静电分化法制备丝素纳米颗粒及其作为顺铂控释载体的研究-纺织工程专业论文.docxVIP

静电分化法制备丝素纳米颗粒及其作为顺铂控释载体的研究 中文摘要肺癌是威胁人类健康的重大疾病之一。顺铂是有效的抗肿瘤化疗药物。提高顺铂 载体的靶向性，使顺铂高效、持续地发挥其生物学作用，并降低其对正常组织细胞的 毒性，是肺癌等肿瘤化疗领域的重要研究课题。本文采用无污染加工技术制备了具有 较小粒径的丝素蛋白纳米颗粒，研究了制备条件与纳米颗粒结构之间的关系，并探讨 了该纳米颗粒作为顺铂缓释载体的特性及其对人肺腺癌细胞A549的诱导凋亡作用和 对小鼠成纤维细胞L929的毒性。首先，采用高压静电分化和冷冻干燥相结合的技术制备了直径可控的丝素蛋白纳 米颗粒。用扫描电镜（SEM）观察了丝素溶液浓度、电压、溶液推注速度对纳米颗粒 的大小及形貌的影响。结果表明，该丝素纳米颗粒湿态的平均直径约为170-224nm，干态的平均直径约为53-86nm。当丝素溶液浓度或推注速度较小时，制备的纳米颗粒 的直径也较小，当溶液浓度或推注速度相对较大时，制备的纳米颗粒的平均直径较大。 电压相对较小（11、12kV）时，制备的丝素纳米颗粒的直径较大，而当电压增大时（13、14kV），得到的纳米颗粒直径相对较小，但当电压进一步增加至15kV和16 kV时，分化出的纳米颗粒直径稍有增加，不均匀性也增大。其次，利用丝素中的羧基与顺铂中的Pt-Cl之间的配位键交换反应制备了载顺铂 丝素纳米颗粒，探讨了顺铂/丝素比例分别为1/5和1/10时纳米颗粒的包埋率、载药 率及体外释药率随时间的变化规律。结果表明，顺铂/丝素比例为1/5时制得的纳米颗 粒的载药率和包埋率均高于比例为1/10的纳米颗粒。顺铂/丝素比例为1/5的纳米颗 粒在最初的12h内有突释现象，累积释放率达36.7%，之后纳米颗粒中的顺铂缓慢释 放。顺铂/丝素比例为1/10的纳米颗粒中顺铂缓慢释放，无突释现象，15d后累积释 放率小于1/5实验组。最后，分别研究了载顺铂丝素纳米颗粒对人肺腺癌细胞A549的促凋亡作用及对 小鼠成纤维细胞L929的毒性。随着顺铂浓度的增加和培养时间的延长，顺铂诱导癌I中文摘要静电分化法制备丝素纳米颗粒及其作为顺铂控释载体的研究细胞凋亡的作用显著加强。载顺铂丝素纳米颗粒表现出与纯顺铂相似的诱导A549细 胞凋亡的能力，但对正常细胞L929无明显的促凋亡作用，表明丝素作为顺铂的载体能明显降低游离顺铂对正常细胞生长的抑制作用。 本文采用物理方法制备的粒径可控的丝素蛋白纳米颗粒作为顺铂缓释载体，能够有效诱导肺癌细胞A549的凋亡，同时对正常细胞L929无明显影响，为肺癌的药物 治疗及化学治疗提供了有效的递药系统。关键词：丝素蛋白；纳米颗粒；静电分化；顺铂；细胞作者：瞿静 指导教师：李明忠 教授TheResearchof SilkFibroinNanoparticlesPreparedby Electrostatic DifferentiationastheControlledRelease CarrierofCisplatinAbstractLungcancerisoneofthemostharmfulformsofcancerwhichthreatensthehealthof humanbeings.Cisplatin(CDDP)isaneffectivedrugusedinchemotherapyof cancers.Itis akeyresearchinthefieldofcancerchemotherapytoimprovethetargetingof cisplatin-carrierssoastoexertthebiologicalfunctionsofcisplatinsustainablyandto reduceitscytotoxicitytonormaltissues.Silkfibroin(SF)nanoparticleswerepreparedwith pollution-freetechnologyinthis paper,andthe relationshipbetweenpreparationconditions andnanoparticlesstructurewasinvestigated.Atthesametime,thereleasecharacteristics ofSFnanoparticlesasthecarrierofcisplatinanditsinducingapoptosistoA549cellsas wellasits cytotoxicitytoL929cells werediscussedhere.SFnanoparticles withcontrollablediameters werefabricatedbyelectrostati