swan微生物的实验室培养.ppt

微生物 细菌的外形与大小 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后 显微镜观察。 菌落 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 选择培养基： 稀释涂布平板法:将菌液进行系列梯度稀释,再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面进行培养。 目的：稀释分散成的单个细胞繁殖形成菌落。 系列稀释操作 涂布平板操作 实验操作 大肠杆菌在恒温箱中培养 接种后的培养基和一个未接种的培养基 37 ℃ 12h和24h后分别观察并记录 结果分析与评价 （一）培养基的制作是否合格 若未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 若培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。 菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 * * 泡菜 反应条件 检测方法 原理 微生物类型 腐乳 果醋 果酒 酵母菌，真菌，兼性厌氧 醋酸菌，细菌，好氧菌 毛霉，真菌，好氧 乳酸菌，细菌，厌氧菌 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 18～25 ℃ ， 无氧 重铬酸钾与其反应呈灰绿色 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 30 ～ 35℃，通入氧气 品尝、pH试纸检测 毛霉产生蛋白酶和脂肪酶 15～18℃接种，保持一定湿度，酒精含量12％左右 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 常温，无氧条件 pH检测，亚硝酸盐的检测方法 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生生物 特点：结构简单,个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构. 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 病毒 病毒 SARS病毒、 禽流感病毒 放线菌 单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝） 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的 应用 霉菌的孢子生殖 细菌的模式图菌 拟核 图1-1 常见的三种细菌典型形态 A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 芽孢又小又轻，可以随风飘散。 当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 芽孢：椭圆形的休眠体 菌落 子细胞群体 细菌的菌落特征因种而异 思考： 我们曾经学过根据菌落来辨别细菌的例子！ S型 R型 基础知识 (一)培养基 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等，液体培养基用于发酵工程。 （2）按功能来分，分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分，分为天然培养基和合成培养基。 培养基的类型 供微生物生长繁殖的营养基质 加入青霉素（or其他抗生素）的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌（or其他微生物,or分离导入了目的基因的受体细胞) 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 固体培养基 琼脂？？？ 一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 另外还需要满足微生物生长对( ）、( )以及 ( )的要求。 基础知识 培养基: 培养基的成分 pH 特殊营养物质 氧气 无菌技术 在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法 消毒：使用较温和的化学或物理方法仅杀死体表或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子） 消毒与灭菌： 灭菌：使用强烈的化学或物理因素杀死所有微生物（包括芽孢和孢子） 准备期：操作空间、衣着、手-------清洁消毒 培养器皿、接种用具、培养基---灭菌 操作时：避免微生物污染，应在酒精灯火焰附近 避免已灭菌材料用具与周围物品接触 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6m