试验二十六从茶叶中提取咖啡因试验目的1学习天然药物中.DOC

实验二十 从茶叶中提取咖啡因 实验目的 学习天然药物中有机物质的提取分离方法。 学习脂肪提取器的原理和使用方法。 学习有机化合物升华的基本原理和方法。 巩固复习有机化合物熔点的测定方法 基本原理 茶叶中含有多种生物碱，其中以咖啡碱（又称咖啡因）为主，约占1%-5%。另外还含有11%-12%的单宁酸（鞣酸），0.6%的色素、纤维素、蛋白质等。 咖啡碱是弱碱性化合物，易溶于氯仿（12.5%）、水（2%）及乙醇（2%）等。在苯中溶解度为1%（热苯为5%）。单宁酸易溶于水和乙醇，但不溶于苯。 咖啡碱的化学名称为1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，结构式如下： 含结晶水的咖啡因系无色针状结晶，味苦，能溶于水、乙醇、氯仿等。100oC失去结晶水，并开始升华，120oC升华相当显著，170oC升华很快。无水咖啡碱熔点为234.5oC。 咖啡因工业上靠人工合成。它具有刺激心脏、兴奋大脑神经和利尿等作用，因此可以作为中枢神经兴奋药。 咖啡因可以通过测定熔点和光谱法加以鉴别。 脂肪提取器是利用溶剂回流和虹吸原理，使固体物质连续不断地为纯溶剂所萃取的仪器。溶剂沸腾时，其蒸气通过侧管上升，被冷凝管冷凝成液体，滴入套筒中，浸润固体物质，使之溶于溶剂中，当套筒内溶剂液面超过虹吸管的最高处时，即发生虹吸，回入烧瓶中。通过反复的回流和虹吸，从而将固体物质富集在烧瓶中。脂肪提取器为配套仪器，其任一部件损坏将会导致整套仪器的报废，特别是虹吸管极易折断，所以在安装仪器和实验过程中须特别小心 脂肪提取器也可以将固体物质中所含有的的可溶性物质富集，根据其原理固体物质每一次都能被纯的溶剂所萃取，因而效率较高，为增加液体浸溶的面积，萃取前应先将物质研细，用滤纸套包好置于提取器中，通过不断萃取虹吸，固体中的可溶物质富集到烧瓶中，将提取液浓缩后，得到想得到的固体物质。 为了提取茶叶中的咖啡碱，往往利用适当的溶剂（氯仿、苯、乙醇等）在脂肪提取器中连续抽提茶叶，然后蒸去溶剂，即得到粗咖啡因。 粗咖啡因还含有其他一些生物碱和杂质，利用升华可进一步提纯。 三、主要仪器和药品 10g茶叶，95%乙醇，生石灰，无水乙醇，紫外分光光度计，二氯甲烷。 四、操作步骤 1、咖啡因的提取 A、方法1 装好提取装置（1）。称取10g茶叶，放入脂肪提取器的滤纸套筒中（２），在250mL圆底烧瓶中加入175mL 95％乙醇，用水浴加热，连续提取２小时（3）。待冷凝液刚刚虹吸下去时，立即停止加热。稍冷后，改为蒸馏装置，回收提取液中的大部分乙醇（４）。趁热将烧瓶中的残液倾入蒸发皿中，拌入３g（５）生石灰粉，使成糊状，在蒸气浴上蒸干，其间应不断搅拌，并尽可能压碎块状物，待干燥后将固体在研钵中研碎。最后将蒸发皿放在石棉网上，用小火烘炒片刻，使水分全部除去。冷却后，擦去沾在边上的粉末，以免在升华时污染产物。取一支口径合适的玻璃漏斗，罩在隔以刺有许多小孔滤纸的蒸发皿上，在砂浴中小心加热升华（６）。第一次控制砂浴温度在120℃左右。保持温度10min，此时滤纸上出现许多白色毛状晶体，暂停加热，让其自然冷却至90℃左右。小心取下漏斗，揭开滤纸，用刮刀将纸上和器皿周围的咖啡因刮下。然后重新装好升华装置，调高温度到220℃，保持温度10min，重复第一次升华过程，合并两次收集的咖啡因，称重并测定熔点。 纯粹咖啡因的熔点为234.5℃。 B、方法2、 在600mL的烧杯中，配置20g碳酸钠溶于250mL蒸馏水的溶液。称取25g茶叶，用纱布包好后放入烧杯中，在石棉网上用小火加热煮沸0.5h。注意勿使溶液起泡溢出。稍冷后（约50℃），将黑色提取液小心倾至另一烧杯中。冷却到室温后，转入500mL分液漏斗。加入50mL二氯甲烷摇振1min，静置分层，此时在两界面处出现乳化层（７）。在一小玻璃漏斗的颈口放置一小团棉花，棉花上放置约１cm厚的无水硫酸镁，从分液漏斗直接将下层的有机相滤入一干燥锥形瓶，并用2-3mL二氯甲烷涮洗干燥剂，水相再用50mL二氯甲烷萃取一次，收集于锥形瓶中的有机相应是清亮透明的。 将干燥后的萃取液分批转入50mL圆底烧瓶，加入几粒沸石，在水浴上蒸馏回收二氯甲烷，并用水泵将溶剂抽干。含咖啡因的残渣用丙酮－石油醚重结晶。将蒸去二氯甲烷的残渣溶于最少量的丙酮（８），慢慢向其加入石油醚（60-90℃），到溶液恰好浑浊为止，冷却结晶，用玻璃丁漏斗抽滤收集产物，干燥后称重并计算收率。 2、咖啡因的紫外光谱测定 A、溶液的配制 在分析天平上称取194mg自己制备的咖啡因（经过干燥后的）放入10 mL容量瓶中，加入无水乙醇溶解，得到0.1mol/L的咖啡因溶液，用0.1mL的移液管取出0.1mL的该溶液放入另一干燥的10mL容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度，混合均匀后重复稀释一次，得到10-5mol/L的咖