通用植物总RNA提取试剂盒-深圳中联生物科技开发有限公司.DOC

深圳市中联生物科技开发有限公司 ZL Biotech Corporation 地 址：深圳市南山区桃源街道留仙大道1183号南山云谷创新产业园综合服务楼506-508 电 话：0755传真：0755-8655 0193 网 址：  一般实验室使用，仅用于体外 通用植物总RNA提取试剂盒 （离心柱型） 用于快速提取各种动植物细胞/组织基因组和RNA 目录号：RP3301（50次） RP3302（100次） 使用手册 2008年11月，第1版 深圳市中联生物科技开发有限公司 ZL Biotech Corporation  一、试剂盒组成、储存、稳定性 试剂盒组成 保存 50 次（RP3301） 100 次（RP3302） 裂解液 PL 室温 55 ml 110 ml 去蛋白液 RE 室温 30ml 60ml 漂洗液 RW 室温 15 ml 25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free H2O 室温 10ml 20ml 70%乙醇 室温 22.5ml RNase-free H2O 45mlRNase-free H2O 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free 室温 50 个 100 个 过滤柱 RNase-free 室温 50 个 100 个 吸附柱 RA 收集管（2ml） 室温 100 个 200 个 本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。 注意事项 1． 第一次使用前请先在漂洗液 RW 瓶和 70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打 钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 2． 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使 用，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 3． 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输 和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 4． 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖 紧盖子。 -1- 六、疑难解答（Trouble shooting） 出现的问题 可能的原因 建议解决方法 产量低 样品裂解或者匀浆不彻底 液氮研磨的时候尽量研磨完全， 加入裂解液 PL 后剧烈震荡或者 用枪头吹打帮助裂解。匀浆步骤 可以提高产量。新鲜组织或者植 物组织可以不需液氮，直接在干 净研钵内加入适量裂解液 PL 直 接研磨。 使用的样品或者裂解物在 存放时间过长可能降低 RNA 产 －20℃或者－70℃存放太 量，应尽快的处理样品或者裂解 久 物。 组织本身含 RNA 少 不同类型的组织和细胞含有不同 量的 RNA,对于含量少的组织应 该适当提高起始处理量。 超过了吸附柱的最大吸附 同一个样品使用多个吸附柱，然 能力 后合并得到 RNA。 漂洗液 RW 内忘记加乙醇 第一次实验时，漂洗液 RW 瓶和 70%乙醇瓶中加入指定量无水乙 醇。 OD260/OD280吸光度比值 分光光度计检测吸光度 检测时用 TE 稀释样品 1.6 时，RNA 样品不是溶于 TE， 而是溶于水。低离子浓度 和低 pH 条件下，OD280 值会 较高，造成比值低。 -6-  接前表 出现的问题 可能的原因 建议解决方法 污染了蛋白或者苯酚 RNA降解，完整性不 RNA 提取所用各种物品 按照注意事项准备 RNA 提取的各种 佳 和试剂没有灭活 RNA 酶 用品。 组织取出后没有马上处理 组织应该尽量立刻处理，不能及时处 或冷冻，提取前已经降解 理的应该尽快保存于 RNAfixer、液 氮或者－70℃。 提取的 RNA 样品没有保 尽可能的将 RNA 保存在－70℃的低 存在－20℃或－70℃低温 温。 样品提取过程中降解 提取动作应该尽可能的快，离心应该 低温进行，取用 RNA 时尽量冰上进 行。 下游的RT-PCR实验 忘记做步骤 10，或者将吸 确保做了步骤