第三章+非细胞型生物幻灯片.pptVIP

●双层平板法 技术要点： 1.双层琼脂 , 2.半固体琼脂 3.高浓度宿主细胞, 4.倒上皿温度 ●双层平板法测定效价的优点 1）弥补平板不平 2）噬菌斑位于同个平面，较清晰 3）上层为半固体培养基，有利噬菌体 扩散 ●一步生长曲线（Debruck，1939） 定量描述烈性噬菌体生长规律的 实验曲线，用于反映各种噬菌体潜伏 期、裂解期和裂解量的特征曲线。 1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3、将上述混合物用培养物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞； 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）； 5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘 制出病毒特征性的繁殖曲线； ●实验步骤 问题：1）在一个培养系统中，如何测定噬菌体数量？ 2）请设想不断的定时测定，群体数量的变化过程？ ●裂解期： ●平稳期： 效价最高期 ●裂解量： 每个受染细胞产生的噬菌体的总数。 （平稳期pfu/ 受染细胞？） ●潜伏期：(侵入到装配): 隐悔期；胞内累积期 ●温和噬菌体 溶原性（溶原现象）:温和噬菌体侵入宿主后并不引起宿主细胞裂解的现象称之。 溶原菌：受温和噬菌体感