遗传修饰动物模型幻灯片.pptVIP

1、第一例嵌合体小鼠 1974年最早把猿猴病毒40(SV40)注入小鼠囊胚腔中得到部分组织中含有SV40DNA的嵌合体小鼠。但无任何表型改变。 2、第一个转基因小鼠系 1976年建立了世界上第一个转基因小鼠系，这些小鼠基因组中插人了莫氏白血病病毒基因。他们是运用反转录病毒与小鼠卵裂球共培养把外源DNA插入到小鼠的基因组中。 3、第一例显微注射法产生转基因小鼠 1980年，Gordn等把SV40DNA显微注射到小鼠受精卵的原核中，获得了两只转基因小鼠，创建了显微注射转基因方法。 4、“超级鼠”　1982年，Palmiter和Brinster用此方法把大鼠的生长激素基因导入小鼠受精卵，获得了成年体重是对照组小鼠2倍的“超级鼠”，首先证明外源基因可在受体中表达，并且表达产物具有生物活性。 5、转基因家畜的产生转基因家兔、绵羊和猪(Hammer等，1985)、牛(Bondioli等，1988)和山羊(Ebert等，1991)等相继出世。 6、利用转基因生产重组蛋白 1987年，Simons等在转基因小鼠的乳汁中得到绵羊的β-球蛋白，1988年，该研究小组又从转基因绵羊的乳汁中得到了α-抗胰蛋白酶。目前，已有数十种蛋白实现了转基因生产。 7、转YAC的转基因小鼠 近10年内，陆续出现用全长酵母人工染色体（YAC）DNA来产生转基因小鼠。 东北农业大学－国内首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪 绿色荧光蛋白－猪胎儿成纤维细胞－克隆 1987年，世界上第一只商业化转基因绵羊在英国著名的罗斯林研究所诞生。转基因母羊的乳汁中可以分泌α-抗胰蛋白酶。 2010年，FDA批准转基因鲑鱼 （l）疾病型转基因动物 替代： 避免了人体实验造成的风险和伦理问题。 潜伏期长，病程长和发病率低的疾病 可控： 品系，感染病原体 实验环境 方便： 样品收集 结果分析容易（统计）； 人畜共患病比较，研究疾病机理 （2）利用转基因动物制药： 生物反应器重组蛋白药物 欧洲医药评价署人用医药产品委员会 2006年6月2日首次批准了用转基因山羊奶研制而成的抗血栓药物Atryn（抗凝血酶）上市 目前世界上还有利用转基因绵羊、牛和兔乳腺生物反应器生产的人α-抗胰蛋白酶（抗蛋白酶缺乏性肺气肿药物）、重组组织血纤维蛋白溶酶原激活剂（抗栓药）和人C1抑制剂（治疗血管神经性水肿的药物）等重组蛋白药物也已经完成或进入临床Ⅲ期试验，特别是治疗性抗体药物，发展潜力更大。 目前已在下列动物的乳汁中生产出一些人类蛋白质药物： 牛：抗凝血酶、纤维蛋白原、人血清白蛋白、胶原蛋白、乳铁蛋白、糖基转移酶、蛋白C等； 山羊：抗凝血酶原、抗胰蛋白酶、血清白蛋白、组织纤溶原激活因子、单克隆抗体等； 绵羊：抗胰蛋白酶、凝血因子Ⅸ、蛋白C； 猪：凝血因子Ⅸ、蛋白C、纤维蛋白原、血红蛋白。 ?转基因动物的技术路线 经典的技术路线? 目的基因 显微注射?已交配的 受体动物 供体动物 输卵管 转基因动物 取出 移植 妊娠 缺点： 注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。 转基因动物的技术路线(续) ?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫  目的基因 非手术 胚胎移植? 体外受精 体外培养 检测 卵子 受精卵 多细胞胚胎 整合外源基因精子 或囊胚 的胚胎 优点： 受精卵的成活率高达90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。 ?转基因动物的技术路线（续） 整合卵受精的技术路线：? 目的基因