4.2 血红蛋白的提取和分离（学生版）—《课时同步君》2017-2018学年高二生物人教选修1.docVIP

专题4 DNA和蛋白质技术 课题2 血红蛋白的提取和分离 一、选择题（12小题） 1．蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术，下列有关叙述不正确的 A．根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性，可将样品中各种不同蛋白质分离 B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质 C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质 D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质 2．以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是 A．红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水，重复洗涤三次 B．将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9％的NaCl溶液透析12小时 C．凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在 D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢 3．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是 A．若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊在沉淀中，则丙也一定在沉淀中 B．若用凝胶色谱法分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快 C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋内，则乙也一定保留在袋内 D．若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丁形成的电泳带相距最远 4．下列操作正确的是 A．分离红细胞时采用低速长时间离心 B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可 C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心 D．透析时要用20 mmol/L的磷酸缓冲液，透析12 h 5．下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是 A．是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法 B．在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，以致最后流出 C．凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系 D．一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来 6．有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是A．它们都是分离蛋白质的重要方法 B．它们的原理相同 C．使用凝胶色谱法需要用缓冲溶液而电泳不需要 D．以上说法都正确 7．关于凝胶色谱柱的装填，下列叙述错误的是 A．交联葡聚糖凝胶（G-75）“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值 B．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液 C．用300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤凝胶12 h D．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装 8．使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂 蒸馏水 生理盐水 20 mmol/L的磷酸缓冲液 清水 柠檬酸钠 A． B． C． D． 9．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷电性相同的电极方向移动 10．以下对DNA和血红蛋白的提取与分离（鉴定）实验的分析错误的是 A．都要用猪血细胞来做实验材料 B．在DNA的粗提取中可利用DNA在不同浓度盐溶液中的溶解度不同而析出 C．在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA或血红蛋白 D．将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂沸水浴后呈现蓝色 11．将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第2层是 A．甲苯 B．血红蛋白水溶液 C．脂溶性物质的沉淀层 D．其他杂质的沉淀 12．下列试剂可用于血红蛋白释放的是 0.9%的生理盐水 甲苯 磷酸缓冲液 蒸馏水 梓檬酸钠 A． B． C． D． 二、非选择题（3小题） 13．某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程”如下： 实验准备（配制缓冲液、血细胞悬液）→样品处理（洗涤、破碎、离心等）→蛋白质粗分离（透析）→纯化、纯度鉴定（凝胶色谱法、电泳等） 请回答下列有关问题： （1）样品处理中红细胞的洗涤要用________________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是________________。 （2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是________，若要尽快达到理想的透析效果，可以________________（写出一种方法）。 （3）电泳利用了待分离样品中各种分子的________等的差异，而产