北京大学分离原理课件色谱理论基础.pptVIP

色谱理论基础 一、色谱过程热力学 分配平衡和分配系数 分配系数(K)与保留时间(tR) 容量因子(保留因子，Retention factor) 色谱过程分类 分配系数与柱温的关系 塔板理论 (the plate model) 塔板理论基本假设 理论塔板数的计算 塔板理论的优缺点 色谱动力学 速率理论 1）随机过程、方差和扩散 2）色谱分离过程中的独立的随机过程 柱外效应（extra-column effect） 柱内谱带展宽效应 多路径效应（multipath effect）或涡流效应（eddy diffusion） 纵向扩散的随机过程 流动相传质阻力（the resisitance to the mass transfer in the mobile phase） 固定相传质阻力（the resisitance to the mass transfer in the stationary phase） 固定相传质的随机过程 影响固定相传质（ ?s2 ）的因素 速率理论方程讨论: 1） H~u曲线 固定相粒度大小对板高的影响 参考资料★其他色谱理论 平衡色谱理论 思考题：根据速率理论方程讨论影响色谱峰展宽的因素 （1）流动相线速u对板高H的影响 （2）容量因子k对H影响 （3）液膜厚度对H影响 （4）扩散系数Dm和DS对H影响 （5）填料粒度对H影响 （6) 填充均匀度对H影响 （7）柱温对H影响。 上述因素在气相色谱和液相色谱中的影响程度和重要性上有什么区别？ 如果用n 代替neff 不同分离度时色谱峰分离的程度 1.分离度与柱效的关系 由分离方程式看出，具有一定相对保留值的物质对，分离度直接和有效塔板数有关，说明有效塔板数能正确地代表柱效能。而分离方程式表明分离度与理论塔板数的关系还受热力学性质的影响。当固定相确定，被分离物质对的选择因子确定后，分离度将取决于n。这时，对于一定理论板高的柱子，分离度的平方与柱长成正比，即 2. 分离度与选择因子的关系 α2,1大，选择性好。当 α2,1= 1时，R = 0。这时，无论怎样提高柱效也无法使两组分分离。 α2,1的微小变化，就能引起分离度的显著变化。一般通过改变固定相和流动相的性质和组成或降低柱温，可有效增大α2,1值。 练习题 已知物质A和B在一根30.00 cm长的柱上的保留时间分别为16.40 min和17.63 min。不被保留组分通过该柱的时间为1.30 min。峰底宽度分别为1.11 min和1.21 min，计算： （1）柱的分离度； （2）柱的平均塔板数； （3）达到1.5分离度所需的柱长度。 解 ： （1）柱的分离度 R = 2（17.63 - 16.40）/（1.11 + 1.21） = 1.06 （2）柱的平均塔板数 n = 16 (16.40 /1.11)2 = 3493 n = 16 (17.63 /1.21)2 = 3397 n平均 = （3493 + 3397）/ 2 = 3445 基本的色谱分离方程式 一般说，当R1时，两峰有部分重叠；当R=1时，分离程度可达98%；当R=1.5时，分离程度可达99.7%。 通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。 分离度 改变选择因子 提高分离效率 ? 提高选择因子 比增加分离时间更有效 改变相对保留值比改变绝对保留值更有效 ? 3.分离度与容量因子的关系 当k在2 -5时，可在较短的分析时间，取得良好的分离度 除使用分辨率R来表示柱的分辨能力外，峰容积N’也常用来进行柱性能的定性和比较。理论塔板数为n的毛细管柱峰容量可写成： 这一公式可直接比较各种柱子分析复杂样品的潜力！ 峰容量 分子热运动是引起扩散的根本原因。各种分子扩散都是基于分子在介质中的向前或向后的杂乱无章的跳跃。随着时间的推移，每个分子都要经历一系列杂乱运动阶段。因为单个分子将向一个或另一个方向做随意的跳跃，所以对样品带中的一群分子而言，就会表现出从它的原有位置向外扩散。这样，一个很狭窄的原始谱带便加宽成一个呈现高斯分布外形的浓度分布谱带。 随机过程中谱带扩展程度取决于随机步距的、随机步频率及长度经历的时间长短等。说明这种依赖关系的简单模型就是随机行走模型。 随机行走模型假定一个经历了n个固定步长为l的路径，而这些具有一定步距的步子是向前还是向后，却是由随机效应决定的。在经历了许多步后，其分布方差为 可见，总步数n随时间增大，离散方差也是随时间变大的。 扩散过程的随机过程： 对于以恒速为v