毕业论文--脂肪酶测定方法的探讨.docVIP

脂肪酶测定方法的探讨 目 录 中文摘要在国际市场上还是一个新酶种。碱性脂肪酶是在碱性条件下水解的脂肪酶，生产的主要原料为小麦、玉米等农副产物，通过生物发酵技术转化。它可以水解天然油脂，产生脂肪酸和甘油，是一种专门在异相系统油水接口上水解特殊酯类的酶。 　　我们常用各种含酶洗衣粉，其中的酶制剂主要有碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶用于分解蛋白质类污物，如汗渍、血渍等。碱性脂肪酶则主要作用于脂肪酸及其酯类污物，也就是我们通常所指的油污类。 0.2.1食品工业 利用酶作用后释放出的链较短的脂肪酸，增加和改进食品的风味和香味；利用脂肪酶催化的醇解和酯化反应来生产各种香精酯，作调料剂；用有1,3－专一性的微生物脂肪酶提高食用油营养价值和增加食用油的花色品种，制备代可可酯等高档油脂；另外，脂肪酶还可以用于酒类的去浊除渣、改善面包质量，改善蛋白的发泡等等方面。利用脂肪酶来生产兼具机能性与保健疗效的新结构油脂及其衍生物，例如油脂改造 ( 例如可可脂替代品、增加一般动植物油脂中 PUFA 的含量。 ), 乳化剂 ( 例如 glucose esters), 抗氧化剂 , 香料等，不仅增加油脂的广泛应用性，也提升油脂工业的经济效益与发展潜力。 用来做为家庭或工业用清洁剂的添加物，是脂肪酶的最大商业应用领域。根据统计， 1995 年全球的酵素销售总值约在 3 千万美元，其中清洁剂酵素就占了百分之三十，平均每年估计有一千公吨的脂肪酶被加到一百三十公吨的清洁剂中。 0.2.4消旋混合物的光学拆分 酶催化反应的高效性、高立体选择性及温和反应条件使得酶催化拆分法可用于某些用一般法难以拆分的手性化合物。脂肪酶是水解酶,对广泛的底物能催化不对称水解或不对称酯化。脂肪酶对手性化合物如醇、羧酸、酯、酰胺和胺等均有较好的立体选择性,因此脂肪酶被广泛地用来拆分外消旋醇和羧酸。拆分的主要途径为立体选择性水解、酯化或转酯反应。 用乙烯基酯为活性酯，在无水二氯甲烷中用假单胞菌脂肪酶催化氰醇的化学拆分，得S型醇，经化学转化合成β-肾上腺素抑制剂。此外，脂肪酶还用于酯环仲醇的拆分，拟除虫菊酯中间体的拆分，除草剂对甲氧基苯甲酸基奈普生、布罗芬的拆分等 0．2．5纺织工业一、精炼 (scouring) 木棉纤维，方法简单且不伤木棉纤维；二、去除蚕丝及羊毛上的油脂 (degumming) 。皮革工业用于兽皮的去油脂处理 (degreasing) ，可增加铬在兽皮上的吸收与分散、增加染料的吸收、减少化学药剂的用量及去油脂处理时间、减少铬在废水中的排放量与废水的污染性。清洁剂工业将嵌在衣物纤维间的脂肪污垢分解去除。油脂化学工业生产高价值的油脂。 环保业一、废水处理及清理排水管；二、去除造纸用白水及冷却水的黏泥 (slime) 。 　　脂肪酶在制药工业的应用 　　利用脂肪酶独特的立体镜像选择性 (Enantioselectivity) ，可以有效率地区别具有光学活性的立体异构物，以合成多种药物如非类固醇之抗发炎药物 ( 如 naproxen, ibuprofen,suprofen and ketoprofen),nikkomycin-B 等抗生素 , 抗病毒药物 ( 如 lamivudine ，可用来对抗爱滋毒 HIV), 抗癌药物、 alkaloids 、以及维生素等。 　　脂肪酶在生物感应器工业的应用 采用化学方法来定量分析脂质成份，不但花费昂贵而且耗费时间，较不符合经济效益。以脂肪酶作成的生物感应器，是一种较为新的方法。脂肪酶生物感应器除了已被应用在临床样本的诊断外，新的应用领域还包括食品工业、饮料工业、环境污染物 ( 如杀虫剂 ) 之分析以及制药工业等。其它一、隐形眼镜片清洁剂的添加物；二、化装品及洗发剂的添加物。 　　 结果与分析1．1　固态发酵生产脂肪酶的特点 固体基质发酵( solid substrates fermentation, SSF)广义的定义是指一切使用不溶性固体基质来培养微生物的工艺过程。固态发酵生产脂肪酶的微生物很多,大多数是真菌, 如Penicillium simplicissimum, Penicilliumverrucosum, Penicillium restrictum, Penicillium candidum,Rhizopus homothallicus, Rhizopus rhizopodiform is, Rhizopusoligosporus, Rhizopus chinensis, Rhizomucor pusillus,Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Candida rugosa, Yeastlipolytica 等, 部分细菌如B urkholderia cepaci