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基因的本质;金
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猴;现代细胞学和遗传学的研究表明,控制生物性状的主要遗传物质是脱氧核糖核酸即DNA。
在此之前生物科学界认为什么物质是遗传物质?
那怎样证明DNA是遗传物呢?;一、对遗传物质的早期推测;一、对遗传物质的早期推测; 20世纪20年代,大多数科学家认为蛋白质是生物体的遗传物质。;二、DNA是遗传物质的证据;2.R型和S型细菌的区别;; 荚膜是细菌细胞壁外围绕一层较厚的粘性、胶冻样物质。其化学成分随细菌种类不同而有差异,多数细菌的荚膜成分为多糖,如肺炎双球菌。荚膜的形成受遗传物质(基因)控制。
荚膜与细菌的致病性有关,同时荚膜还能储留水分能抗干燥,对保护细菌有作用。荚膜本身无毒性,但在机体内保护细菌抵抗吞噬细胞的吞噬及消化,并能抑制体内杀菌物质(如溶菌酶)的杀菌作用,使细菌易在体内大量繁殖???病。细菌若失去荚膜,致病力也随之减弱或消失。;4.格里菲思(1928)肺炎双球菌转化实验(体内转化);第一组:R型菌注射小鼠 → 小鼠不死亡;(3)实验结论; 实验表明,S型死菌体内有一种物质能引起R型活菌转化产生S型菌,这种转化的物质(转化因子)是什么?;1944年美国的艾弗里(O.Avery)、麦克利奥特(C. Macleod)及麦克卡蒂(M.Mccarty)等人在格里菲斯工作的基础上,对转化的本质进行了深入的研究。 ;(二)艾弗里的肺炎双球菌转化实验(体外转化);(1)
过
程; 由此说明RNA、脂类、蛋白质、荚膜多糖和用DNA酶处理的DNA均不引起转化,而DNA却能引起转化。如果用DNA酶处理DNA后,则转化作用丧失。;(4)影响R型菌转化的因素:
①供体细胞DNA浓度。浓度越高,转化率越高。
②两种细菌的亲缘关系。亲缘关系越近,转化越容易。
③受体菌状态。只有处于感受态细胞才能被转化;S型菌;(三)几个问题:;6.我们吃进的一些生物细胞,其中可能含有活性的DNA,会不会影响我们的细胞,使它们变成其他细胞?
真核生物的细胞膜表面结构与原核生物的大不相同,转化因子不能进入细胞,因而不会发生转化(转化本身只发生在同种菌株间或近缘菌株间)。因此,可以放心去吃想吃的东西,即使含有被加热杀死的S型肺炎双球菌也无妨。;;8.通过对格里菲斯和艾佛里两位科学家的肺炎双球菌的转化实验我们都知道,遗传物质是DNA而不是蛋白质。但是还是有大多数学者认为蛋白质是遗传物质。这是为什么?;荚膜;(三)噬菌体侵染细菌的实验;(4)噬菌体侵染细菌的过程;(4)噬菌体侵染细菌的过程;吸附;如何确定噬菌体注入细菌细胞内的是DNA而不是蛋白质?;2.同位素标记法; 用同位素标记的化合物,化学性质不变,也可以参与生物体内的生化反应。科学家通过特殊的放射性显影仪器追踪放射性同位素标记的化合物,可以弄清楚化学反应过程。科学家也可通过测量分子质量或离心技术来区别稳定性同位素。;标记32P;(1)标记T2噬菌体;②培养含有35S的蛋白质的T2噬菌体;(1)标记T2噬菌体;(2)过程;实验过程及结果;(3)结论;(4)几个问题; 搅拌和离心的目的是为了将噬菌体蛋白质外壳同侵入大肠杆菌的噬菌体DNA分开,以便对放射性元素跟踪测试。离心会使质量较轻的噬菌体颗粒进入上清液,而被感染的细菌则形成沉淀,但这必须保证是在菌体裂解之前进行。
噬菌体侵染细菌的速度很快,在37℃的条件下大约40分钟就可以产生100到300个子代噬菌体。从感染到释放前的这段时间叫潜伏期,大约经历20到30分钟。短时间的保温可获得足够数量的子代噬菌体,但又必须避免超出潜伏期(确保溶液分层),所以离心要在“短时间”保温后及时进行。 ; 第一个实验是把35S标记的噬菌体与细菌混合,吸附几分钟后,离心除去没有吸附上的噬菌体,收集沉淀(噬菌体—细菌混合物),将沉淀悬浮后再一次离心,收集上清液和沉淀,分别测定放射性活性,发现80%的放射活性存在于上清液中,沉淀中只有20%的放射活性,这是由于在这期间大部分吸附的噬菌体已经将其DNA注入细菌而蛋白质外壳与细菌解离进入上清液,但仍然有少部分留在细菌细胞壁上,后来证明沉淀中的20%放射活性确实是由于尾丝与细菌表面结合太紧,以至于不容易把它除去。用32P标记的噬菌体和细菌混合,用上述方法同样处理后实验结果差别很大,70%的放射活性在沉淀里,而30%的放射活性在上清液里。在上清液的30%的放射活性可能是由于搅拌细菌时破裂产生的。(几年后发现有些缺损噬菌体粒子不能将其DNA注入到细菌中去)。把这些沉淀悬浮在生长培养基中重新保温,发现能够产生子代噬菌体的细菌同时也具有从亲代噬菌体转移32P到细菌细胞中去的能力。; 噬菌体侵染细菌实验无可辩驳的证明了DN
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