aba诱导蚕豆气孔运动中h-,2-o-,2-和ca-2+-信号转导机制研究.pdfVIP

河南大掌研究生硕士掌位论 主要英文缩写 英文缩写 英文名称 中文名称 河南大掌研究生硕士掌位论文 摘要 水分胁迫下，叶片ABA含量升高，可有效地抑制气孔开放或促进气孔关闭。因此保卫 细胞ABA信号转导是研究逆境生理的热点之一。目前己知ABA刺激，可导致胞内ca2+、 动。Assmann已提出较为完善的气孔保卫细胞信号转导模式，但是对于ABA信号转导的一 些中间环节仍是人们不断探讨的问题。本实验利用激光共聚焦显微技术、膜片钳技术以及 荧光分光光度技术研究了ABA诱导蚕豆气孔保卫细胞产生H202，并可能是由NADPH氧 化酶催化产生的，同时也证明了H202是引起ca”内流的一个关键成分。 以蚕豆叶片下表皮为材料，将荧光探针HPTs导入蚕豆气孔保卫细胞内，利用荧光光 谱和激光共聚焦显微镜技术，检测了ABA诱导蚕豆气孔关闭过程中H202的产生。结果表 明，ABA和100 mmol几的ABA引起荧光猝灭。我们又用紫外分光度计的方法，在210nm的波长下测定离 体的表皮条，同样支持了以上结论。因此，ABA可以诱导气孔保卫细胞产生H202，其产 生的强度和速度与ABA的浓度直接有关，并且推测：这种H202产生可能是ABA诱导气 孔关闭过程中信号转导链的一个中间成分。 表皮生物分析法显示，H202可抑制气孔开放和促进气孔关闭。维生素c可部分逆转低 氢酶(cAT)在一定程度上也逆转了ABA诱导张开气孔的关闭。荧光光谱实验表明，在嗜 中性白血球NADPH氧化酶抑制剂DPI存在的条件下，与对照相比，大大逆转了由ABA 引起HPTs的荧光强度下降。因此推测：在ABA诱导蚕豆气孔保卫细胞过程中，可能通过 某种方式提高了质膜上的NADPH氧化酶的活性。从而催化02可能形成超氧自由基(02‘)， 再经歧化反应形成H202，而形成的H202参与了气孔运动调节。 利用膜片钳全细胞记录技术，研究了ABA诱导蚕豆气孔保卫细胞产生的H202对质膜 2 河南大掌研究生硕士掌位论文 ABA和H202引起的内向ca2+离子通道电流的加大。我们的结果表明，ABA诱导蚕豆气孔 关闭可能是通过H202激活了ca2’离子通道，并通过保卫细胞质膜内向流入实现的。激光共 聚焦显微镜技术研究了ABA和H202诱导蚕豆保卫细胞胞质钙浓度的变化。这同样支持了 ABA诱导保卫细胞产生的H202可能是ca2+内流的一个上游信号。 关键词：蚕豆，保卫细胞，ABA，H202， NADPH氧化酶，胞质钙浓度，信号转导 3 河南大掌研舅：生硕士掌位论文 ABSTRACT abscisic to thehomlone isa threat syntllesize Dmughtm萄or a矿iculturalproduction．Plants results{n that to a cascadein cells drought，仃iggeringsignaling guard acid(ABA)inresponse