ang2sirna质粒壳聚糖磁性纳米颗粒的制备及分析word格式论文.docxVIP

目录英文缩略词表………………………………………………………………………4 中文摘要……………………………………………………………………………5Abstract……………………………………………………………………………7 一、前言……………………………………………………………………………9二、实验内容 ……………………………………………………………………12 1、材料与试剂……………………………………………………………………122、实验方法………………………………………………………………………143、结果与分析……………………………………………………………………164、讨论……………………………………………………………………………195、结论……………………………………………………………………………25 参考文献 …………………………………………………………………………26 综述 ………………………………………………………………………………33 综述参考文献 ……………………………………………………………………38 致 谢………………………………………………………………………………41英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称及注释ADRadrenaline肾上腺素AngAngiopoietin促血管生成素Ang2CSAngiopoietin-2Chitosan促血管生成素2壳聚糖DEPCdiethyl pyrocarbonate二乙基焦磷酰胺DNAdsRNA EB Fe3O4Deoxyribonucleic acid double-stranded ethidium bromide脱氧核糖核酸双链 RNA 溴化乙锭 四氧化三铁MTDDSmagnetic targeting drug delivery system磁靶向给药系统mRNAmessenger ribonucleic acid信使核糖核酸PBSphosphate buffered solution磷酸盐缓冲溶液PEGpolyethylene glycol聚乙二醇PLApolylactic acid聚乳酸PLGApoly(lactic-co-glycolic acid)聚丙交酯乙交酯pNL-EGFP-U6-Ang2-siRNApNL-EGFP-U6- Ang2-siRNA 转移质粒RNARibonucleic acid核糖核酸RNAiRNAinterferenceRNA 干扰siRNAsmall interfering RNA小干扰 RNAVEGFvascular endothelial growth factor血管内皮生长因子Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米颗粒的制备及分析摘要目的：Ang2 体系广泛表达于人类肿瘤的血管系统重构中, 而在正常组织无 明显表达, 使它成为一个在抗血管生成的癌症治疗中有吸引力的候选靶目标。 我们前期已成功构建了 Ang2-siRNA 重组质粒，用其转染 HUVECs 可抑制 Ang2 的 表达，构建了 Ang2-siRNA 慢病毒表达载体，用其感染恶性黑色素移植瘤可抑制 血管的生成、生长。本课题在前期研究的基础上，制备 Ang2-siRNA 质粒壳聚糖 磁性纳米微粒，检测壳聚糖磁性纳米微粒的理化性质，Ang2-siRNA 质粒与壳聚 糖磁性纳米微粒的结合情况，为下一步 Ang2-siRNA 质粒壳聚糖磁性纳米微粒靶 向治疗恶性黑色素瘤的体内、外实验提供实验材料。方法：1、利用化学共沉淀法制备Fe3O4纳米粒子。2、利用乳化交联法制备壳聚糖磁性纳米微粒。3、使用透射电镜观察壳聚糖磁性纳米微粒的物理形态。4、使用激光粒径检测仪检测壳聚糖磁性纳米微粒的粒径分布。5、进行壳聚糖磁性纳米微粒的沉淀实验。6、Ang2-siRNA质粒表达载体与壳聚糖磁性纳米微粒的结合分析。结果：1、制备的磁性 Fe3O4 纳米粒子肉眼观察下呈黑褐色颗粒状粉末,具有良好的 磁响应性。2、制备的壳聚糖磁性纳米微粒可以很好的分散于蒸馏水中，为黑褐色悬液， 并具有良好的磁响应性，透射电镜示颗粒以椭圆形和球形居多，另有少许不规则 形，边界明显，微粒大小多为 70nm 左右，激光粒径检测仪显示该样品的微粒其 粒径范围为 55.2～82.5nm，平均粒径为 67nm，且粒径分布较窄。3、磁性壳聚糖纳米微粒可以在外加磁场作用下在液体中定向移动。4、成功制备Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒。结论：成功的制备出粒径小、粒径分布范围窄的Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒，并且壳聚糖磁性纳米微粒可与Ang2-siRNA质粒表达载体很好的结合，为下一步进行Ang2-siRNA质粒壳聚糖磁性纳米微粒靶向治疗恶性黑色素瘤 的体内外实验提供实验材料。关键词：Ang2-siRNA；