apkcι信号通路阻断剂atm抑制肝癌上皮细胞间质细胞转化和侵袭转移的作用分析word格式论文.docxVIP

目录缩略词表………………………………………………………………………………（1） 摘要……………………………………………………………………………………（2） Abstract………………………………………………………………………………（3） 前言……………………………………………………………………………………（4） 1第一部分1.1 引言………………………………………………………………………………（6）1.2 材料与方法………………………………………………………………………（6）1.3 结果………………………………………………………………………………（13）1.4 讨论………………………………………………………………………………（17）1.5 参考文献…………………………………………………………………………（19）2第二部分2.1 引言………………………………………………………………………………（22）2.2 材料与方法………………………………………………………………………（22）2.3 结果………………………………………………………………………………（25）2.4 讨论………………………………………………………………………………（29）2.5 参考文献…………………………………………………………………………（31）3第三部分3.1 引言………………………………………………………………………………（34）3.2 材料与方法………………………………………………………………………（34）3.3 结果………………………………………………………………………………（36）3.4 讨论………………………………………………………………………………（42）3.5 参考文献…………………………………………………………………………（44） 综述…………………………………………………………………………………（48） 致谢…………………………………………………………………………………（62） 附录 1（攻读学位期间发表论文目录）…………………………………………（64）缩略词表缩写英文全称中文注译aPKCιATMatypical protein kinase Cιaurothiomalate非典型蛋白激酶 Cι金硫苹果酸根CMLchronic myelogenous leukemia髓细胞性白血病EGFepidermal growth factor表皮生长因子EMTepithelial to mesenchymal transition上皮细胞间质细胞转化HCChepatocellular carcinoma肝细胞肝癌IGF-IIMMH-D3 cellsinsulin-like growth factor II胰岛素样生长因子 II永生化的小鼠肝细胞MMH-R cells持续表达 v-Ha-Ras 基因和GFP 的细胞称为 MMH-R细胞MMH-RT cells使用 TGF-β1 刺激的MMH-R 细胞称为MMP10matrix metalloproteinase 10MMH-RT 细胞基质金属蛋白酶 10NSCLCnon-small lung cancer非小细胞肺癌RArheumatoid arthritis风湿性关节炎TGFβ1 ZEB1transforming growth factorβ-1 zinc finger e-box binding protein 1转化生长因子 β1锌指 e-box 结合蛋白摘 要目的：为了研究 aPKCι 信号通路在肝癌上皮细胞-间质细胞转化中的功能和调节机制， 并为进一步寻找治疗肝癌的靶向药物打下基础。方法：通过 TGF-β1 的刺激和慢病毒感染 v-Ha-Ras 基因，构建出肝癌的 EMT 模型细 胞 MMH-RT 细胞。进而通过 Western blot 检测 aPKCι 和 EMT 标志物的表达情况，分 析 aPKCι 与肝癌细胞 EMT 之间的关系。在 MMH-RT 细胞中验证 ATM 对 aPKCι 信号 通路的阻断作用。进而在经过 ATM 处理后的细胞，通过 Transwell 和 FACS 检测肝癌 细胞侵袭力和凋亡的改变。结果：我们的研究指出，在 TGF-β1 刺激下的 MMH-R 细胞发生 EMT 并伴随 aPKCι 的过表达。另外我们验证了 aPKCι 信号通路阻断剂 ATM 可以抑制肝癌细胞的 EMT 并降低侵袭力。此外，ATM 可以选择性的抑制间质表型的细胞和 HepG2 肝癌细胞的 增殖，并促进其凋亡。同时，ATM 可以促进上皮表型的细胞增殖并对其凋亡和侵袭 影响不大。结论：我们的研究指出 aPKCι 是肿瘤 EMT 的重要标志物，同时可以作为判断肝