b型血友病fix基因突变与发病机制分析word格式论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 前 言 血友病 B（hemophilia B,HB），又称凝血因子Ⅸ缺乏症或 Christmas disease[ HYPERLINK \l _bookmark0 1]，是 常见的 X 性染色体连锁隐性遗传性出血性疾病中的一种，临床上以关节、肌肉和内脏 自发性或者外在创伤后出血不止为其基本特征，由 Aggeler[ HYPERLINK \l _bookmark1 2]等于 1952 年首次诊断 并报道。HB 主要的发病机制是 X 染色体上凝血因子Ⅸ (coagulation factor Ⅸ, F Ⅸ ) 基 因发生突变, 使循环血中 FⅨ功能异常或含量减少, 从而导致细胞表面的活化因子 X 生成障碍，影响了正常血液凝固的进行而致出血。HB 患者绝大多数为男性，女性一 般为携带者，女性患者非常罕见。根据欧美等西方发达国家的流行病学统计资料，HB 在人群中的发病率约为 1/30000[ HYPERLINK \l _bookmark2 3]，约占血友病总数的 15%～20%。中国国内尚缺乏 系统的流行病学统计资料，一般估计我国 HB 发病率约为 1.2～1.5/10 万。依照症状的 轻重及 FⅨ促凝活性（factor Ⅸ coagulant activity, FⅨ: C），临床上将 HB 分为重型（FⅨ: C1%）、中型（FⅨ: C 1%～5%）及轻型（FⅨ:C 5%～30%）[ HYPERLINK \l _bookmark3 4]。 FⅨ主要在肝脏由肝细胞合成后直接分泌进入血液循环[ HYPERLINK \l _bookmark4 5]，是维生素 K 依赖的凝 血因子。人 FⅨ基因位于 Xq27.1-q27.2,基因全长约 33.5 kb[ HYPERLINK \l _bookmark5 6],由 8 个外显子、7 个内含 子以及侧翼序列组成[ HYPERLINK \l _bookmark6 7],FⅨ mRNA 全长为 2804 bp，编码含 461 个氨基酸残基的 FⅨ 蛋白前体，再经过一系列酶促作用及修饰形成含 415 个氨基酸残基的成熟 FⅨ蛋白， 分子量约为 57kDa，体内循环血浆 FIX 的蛋白浓度约为 4 μg/mL[ HYPERLINK \l _bookmark7 8 HYPERLINK \l _bookmark8 ,9]。目前最新的人 类突变数据库（The Human Gene Mutation Database，HGMD）共收录了关于 FIX 的各 种基因突变类型有 1091 种,涵盖了包括点突变 697 种，剪切位点突变 97 种，大片段缺 失 63 种等等不同突变类型。随着全世界范围内对 HB 研究的不断深入,HB 患者的病例 数目不断积累和检测手段的改进，仍不断有新的基因突变类型被报道。已知的 FⅨ基 因突变类型包括无义突变、错义突变、小的插入、缺失及大片段缺失等, Mukherjee 等 通过对 HB 基因数据库分析发现 FⅨ基因突变热点在 CpG 二核苷酸区域[ HYPERLINK \l _bookmark9 10];英国 Giannelli 等建立的 FⅨ基因突变库共收集 1713 例患者，其中点突变约占 80%[ HYPERLINK \l _bookmark2 3]。外 显子 4 编码 FⅨ的表皮生长因子样结构域Ⅰ（EGF-1），外显子 5 编码 EGF-1 区、外显 子 8 编码 FⅨ的催化结构域，这些结构域对于 FⅨ蛋白发挥正常的催化凝血功能都十 分重要，其相应基因区域突变发生频率也较高；外显子 6 编码 FⅨ蛋白活化结构域, 可 能是其编码的氨基酸在蛋白中所起的作用不大有关，已报道的关于外显子 6 的基因突 变相对较少[ HYPERLINK \l _bookmark10 11]。 当前对 HB 患者及其携带者的基因诊断方法大体上可分为直接诊断法和间接诊断 法[ HYPERLINK \l _bookmark11 12]。间接诊断法有单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)、短串联 重复序列(short tandem repeat，STR)和限制性片段长度多态性(restrictive fragment length polymorphism，RFLPs)等。直接诊断方法包括变性梯度凝胶电泳法(denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE)、单链构象多态性(single strand conformation polymorphism， SSCP)、变性高效液相色谱法( denaturing high performance liquid chromato