cuso4对阿尔茨海默病模型大鼠影响的实验分析word格式论文.docxVIP

必然的相关性，因此AD患者脑内Cu 过量或是不足仍存在争议，因此设计此课题进行研究。材料和方法选择SPF级成年雄性SD大鼠90只（所有大鼠预先参加水迷宫实验，经数据分析淘汰有记忆障碍和认知功能障碍的大鼠）。所有大鼠随机分组：正常组、PBS组、AD模型组、低剂量CuSO4组（1mg／kg）、中剂量CuSO4组（3mg／kg）、高剂量CuSO4组（5mg／kg），以上各组15只大鼠。处理：正常组不做处理，PBS 组选择右侧海马CA1区注射无菌PBS溶液，AD模型组为右侧海马CA1区注射质量分数为2ug/uL的凝聚态Aβ1-42 5uL，低、中、高剂量CuSO4组分别在AD造模手术的同时取右侧侧脑室注射无菌CuSO4溶液5ul，术后第7d，应用Morris 水迷宫检测大鼠的行为学变化，历时5d。水迷宫结束后，各组取5只大鼠灌注取脑组织，作冰冻切片染色（HE染色和尼氏染色）观察神经元凋亡情况；各组取5只大鼠断头取脑，取CuSO4注射侧海马组织，检测SOD活性及MDA含量，观察大鼠抗氧化应激能力；各组取5 只大鼠断头取CuSO4 注射侧海马组织，采用Western blot方法检测总Tau蛋白和糖原合成酶激酶3β的表达变化。所有数据均采用SPSS17.0软件进行统计学处理，数据表示用X±S，t检验分析，检验标准α=0.05。结果1Morris水迷宫：与正常组比较，PBS组大鼠寻找平台时间（逃避潜伏期）、穿越平台象限次数、平台所在象限停留时间比三项指标无明显变化（p0.05）；AD模型组与正常组、PBS组比较，前者寻找平台时间（逃避潜伏期）显著延长，穿越平台象限次数减少，平台象限停留时间比缩短（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4 处理组与AD模型组比较，CuSO4处理组逃避潜伏期明显延长，穿越平台象限次数减少，平台象限停留时间比缩短（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4处理组之间比较，随着CuSO4注射剂量的增加，大鼠的逃避潜伏期延长更明显，同时穿越平台次数减少程度加剧，平台象限停留时间比进一步下降（p0.05）。2冰冻切片病理染色：AD模型组与正常组、PBS组比较，AD模型组的海马区锥体细胞计数明显少于后两者(p0.05)；低、中、高剂量CuSO4处理组与AD模型组比较，前者的锥体细胞数目明显减少(p0.05)；低、中、高剂量CuSO4处理组之间比较，随着CuSO4注射剂量的增加，锥体细胞数目减少程度更为明显II（p0.05）。3GSK-3β及总Tau蛋白：AD模型组与正常组、PBS照组比较，AD模型组GSK-3β 及总Tau蛋白表达明显增强（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4处理组与AD模型组比较，CuSO4处理组两种蛋白表达明显上调（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4 处理组之间比较，随着CuSO4注射剂量的增加，GSK-3β及总Tau蛋白的表达继续上升（p0.05）。4抗氧化应激能力：AD模型组与正常组、PBS组比较，前者的SOD活性下降，MDA含量上升（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4处理组与AD模型组比较，CuSO4 处理组SOD活性下降，MDA含量上升（p0.05）；低、中、高剂量CuSO4处理组之间比较，随着CuSO4注射剂量的增加，SOD活性下降，MDA含量上升（p0.05）。结论CuSO4侧脑室注射能够损害AD模型大鼠的学习记忆能力，促进海马神经元凋亡，增加糖原合成酶激酶3β 和Tau蛋白的表达和降低大鼠的抗氧化应激能力。关键词阿尔茨海默病；水迷宫；CuSO4；Tau；GSK-3βIIIExperimentalStudyofeffectofCuSO4onAlzheimersdiseasemodelratsPostgraduate:Meiqin Zhou Supervisor: Prof.YuanhongHeDepartment ofNeurology,FifthAffiliated Hospital ofZhengzhou University CerebrovascularDiseaseInstituteofZhengzhouUniversityZhengzhou 450052, ChinaAbstractBackgroundand objectiveAlzheimersDiseaseisprogressiveneurodegenerativedisordercharacterizedbycognitiveandmemorialdysfunctions.AlargenumberofAβ (amyloidbeta)deposits outofNeurons,neurofibrillarytangles(NFTs)andthelossofalargenumberofneuronsinareasofhi