2018高考生物大二轮复习 第01部分 专题07 现代生物科技专题 整合考点21 基因工程和细胞工程学案.docVIP

整合考点21　基因工程和细胞工程 考纲 要求 考频(全国卷) 1.基因工程的诞生 Ⅰ 5年0考 2.基因工程的原理及技术(含PCR) Ⅱ 5年7考 3.基因工程的应用 Ⅱ 5年4考 4.蛋白质工程 Ⅰ 5年1考 5.植物的组织培养 Ⅱ 5年4考 6.动物的细胞培养与体细胞克隆 Ⅰ 5年6考 7.细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ 5年5考 8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 Ⅰ 5年4考 9.胚胎干细胞的移植 Ⅰ 5年3考 10.胚胎工程的应用 Ⅱ 5年4考 11.简述生态工程的原理 Ⅱ 5年1考 12.生态工程的实例 Ⅰ 5年0考 1．理清基因工程3种操作工具的作用与特点 限制酶 DNA连接酶 载体 作用 切割目的基因和载体 拼接DNA片段形成重组DNA分子 携带目的基因进入受体细胞 作用 部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 作用 特点 (条 件) (1)识别特定的核苷酸序列； (2)在特定位点上切割DNA分子 (1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端； (2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端 (1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制； (2)有一个至多个限制酶切割位点； (3)具有特殊的标记基因 2．掌握基因工程的操作步骤 (1)目的基因的获取途径： 方法 具体操作 直接分离 从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取 人工 合成 化学 合成 已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板 反转 录法 以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成 PCR 技术 扩增 目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下延伸 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建： ①表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。 ②启动子和终止子：启动子是RNA聚合酶结合位点，启动转录；终止子是终止转录的位点。 ③基因表达载体的构建过程 (3)将目的基因导入受体细胞： 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2＋处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 (4)目的基因的检测与鉴定： 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子 检测 第一步 目的基因是否进入受体细胞 DNA分子杂交(DNA和DNA之间) 是否成功显 示出杂交带 第二步 目的基因是否转录出mRNA 分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 是否成功显 示出杂交带 第三步 目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交 是否成功显 示出杂交带 个体 水平 鉴定 做抗虫或抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能是否相同 3．理清植物细胞工程两大技术 4．比较并把握细胞工程的几个流程图 细胞工程技术 技术过程图示 植物 组织 培养 动物 细胞 培养 植物 体细 胞杂 交 动物 细胞 的融 合 单克 隆抗 体的 制备 核移 植 5．动物细胞培养的特殊条件归纳 (1)胰蛋白酶的使用：首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织，以制备单细胞悬液；培养过程中发生接触抑制时，同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开。 (2)避免杂菌污染的措施：培养液及培养用具灭菌处理；加入一定量的抗生素；定期更换培养液。 (3)特殊的营养条件： ①液体培养基。②加入动物血清、血浆等。③通入氧气以满足代谢的需要。④通入二氧化碳以维持培养液的pH。 6．澄清容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞 (1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。 (2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。 (3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。 　聚焦基因工程 1．(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的)。 图(a) 图(b) 根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)经BamH I酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是________________________________________________________________________ ___________________________________________