egfr信号通路通过 egr2促进骨祖细胞增殖并抑制骨祖细胞凋亡的实验性分析word格式论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 EGFR 信号通路通过 Egr2 促进骨祖细胞增殖并抑制骨祖细 胞凋亡的实验性研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科 博士研究生 兰生辉 导 师 郭晓东教授 Ling Qin 助理教授（宾夕法尼亚大学） 摘 要 骨组织结构完整性的维持依赖于骨祖细胞池中成骨细胞的不断更新，该生物学过 程由许多生长因子进行精细调控。表皮生长因子受体（EGFR）配体是目前已知的骨祖 细胞有丝分裂原。但这些配体调节骨祖细胞池的具体机制没有得到详细阐述，尤其是 EGFR 信号通路在调节骨祖细胞凋亡中的作用没有得到详细研究。在本研究中，我们证 实了 EGFR 信号通路的激活通过促进骨祖细胞增殖并抑制骨祖细胞凋亡，增加骨祖细 胞数量。该结论在大鼠颅骨组织器官培养实验中得到进一步证实。在大鼠颅骨组织器 官培养实验中，表皮生长因子（EGF）在增加增殖细胞数量的同???，降低了凋亡细胞 数量，从而增加成骨细胞总数量。骨祖细胞系 MC3T3 细胞 Microarray 分析提示，EGFR 信号通路能诱导抗凋亡基因 Mcl1 以及早期生长反应基因（Egr1，Egr2，Egr3）的表 达。过表达 Egrs 的抑制蛋白 Nab2 可抑制 EGF 诱导的骨祖细胞数量增加。进一步实验 表明，以 SiRNA 降低 Egr2 的表达，可抑制 EGF 诱导的骨祖细胞数量增加，而以 SiRNA 降低 Egr1、Egr3 的表达，则对 EGF 诱导的骨祖细胞数量增加没有影响。进一步研究 证实 Egr2 是 EGF 促进骨祖细胞增殖并抑制骨祖细胞凋亡的主要介导基因。采用腺病 毒过表达、抑制剂以及 SiRNA 等实验方法，我们证实了 EGFR 信号通路激活 MAPK/Erk 通路，进而诱导 Egr2 的表达，从而导致了 Mcl1 的增加，最终抑制细胞凋亡。同时， 另一骨祖细胞有丝分裂原和存活因子成纤维细胞生长因子（FGF）2,也能通过诱导 Egr2  的表达，进而促进骨祖细胞增殖,抑制骨祖细胞凋亡。这些结果表明，Egr2 在生长因 子介导的骨祖细胞数量增加中起着重要作用。总的来说，我们的实验结果清楚地说明 了 EGFR 信号传导通路，通过诱导 Egr2 的表达，促进骨祖细胞增殖，抑制骨祖细胞凋 亡，进而在调节骨祖细胞库的生物学功能中，起着重要的作用。  EGFR signaling promotes proliferation and survival in osteoprogenitors by increasing Egr2 expression D.Candidate : Lan Shenghui Major : Surgery (Orthopedics) Supervisor : Prof. Guo Xiaodong Assistant Prof. Ling Qin(University of Pennsylvania) Abstract The maintainance of bone architecture requires continuous generation of osteoblasts from osteoprognitor pool. Epidermal growth factor receptor (EGFR) ligands are well known mitogens for osteoprogenitors, however the underlying mechanisms by which EGFR signaling regulates osteoprogenitor pool are largely unknown. Here, we demonstrated that the activation of EGFR increasesd the number of osteoprogenitors by promoting both cell proliferation and survival. This result was further confirmed by calvarial organ culture in which EGF elevated the number of proliferative cells and suppressed the number of apoptotic cells, resulting in an overall increase in total osteoblast lineage cells. Microarray analysis of an osteoprogenitor cell line MC3T3 cells revealed