fabsa修饰磁性胶束的制备及其应用word格式论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 华申科技大学 罔济医学院 独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切 法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 摘要 目的： 制备 FA-BSA 修饰的高分子聚合物磁性胶束作为肿瘤特异性靶向磁共振对比剂， 用于肿瘤靶向磁共振成像。 方法： 1.合成：（1）采用化学共沉淀法及油酸修饰制备单分散的磁性纳米粒子（SPIONs）； （ 2 ） 采 用 自 由 基 聚 合 法 合 成 阳 离 子 两 亲 高 分 子 聚 合 物 （poly(HFMA-co-MOTAC)-g-PEGMA）；（3）采用自组装技术制备阳离子高分子 聚合物磁性胶束（简称“未修饰的磁性胶束”）；（4）阳离子磁性胶束与 FA-BSA 通过静电相互作用最终合成 FA-BSA 修饰的磁性胶束。 2.表征：（1）使用 1H NMR 观察两亲高分子聚合物的化学组成，使用 FTIR 观察 磁性纳米粒子、高分子聚合物和 FA-BSA 修饰的磁性胶束的化学结构；（2）电 镜观察磁性胶束的物理形态和大小，DLS 检测磁性胶束的水合粒径及分布；（3） 使用热重分析磁性胶束的载铁含量，绘制磁滞回线观察所制备胶束的磁性特点； （4）用 3T 磁共振扫描机及腕关节线圈，采用多回波 T2WI 磁共振成像方法检测 磁性胶束的横向弛豫率。 3.体外细胞实验：（1）使用 MTT 法检测磁性胶束的细胞毒性；（2）细胞摄取实 验：将不同浓度的 FA-BSA 修饰的磁性胶束和未修饰的磁性胶束分别与人肝癌细 胞 Bel-7402（叶酸受体阳性表达）和 Hep3B（叶酸受体阴性表达）共培养，其中 未修饰的磁性胶束作为对照，分别采用磁共振成像、细胞铁含量测定、普鲁士蓝 染色的方法，对于两种肿瘤细胞对两种磁性胶束的摄取量进行定性、定量及病理 分析。 4.体内实验：（1）制备裸鼠肝癌皮下瘤模型；（2）载瘤动物活体磁共振成像：尾 静脉注射四种不同的造影剂，包括 T1 对比剂 Gd-DTPA，T2 对比剂 Feridex，以 及合成的未修饰磁性胶束与 FA-BSA 修饰的磁性胶束，观察所制备的 FA-BSA 修 饰的磁性胶束对载瘤动物活体磁共振成像的效果。其中钆、菲立磁与单纯磁性胶 I II II 束作为对照。（3）组织化学分析：对肝脏和肿瘤组织进行铁特异性普鲁士蓝染色, 定性分析磁性胶束在肝脏和肿瘤组织中的分布和含量；（4）肿瘤组织铁定量测定， 载瘤裸鼠尾静脉注射未修饰磁性胶束与 FA-BSA 修饰的磁性胶束，24h 后定量测 定肿瘤组织的铁含量。 结果： 1.成功合成未修饰的磁性胶束与 FA-BSA 修饰的磁性胶束； 2.表征：（1） 1H NMR、FTIR 结果从化学结构上证明磁性胶束合成成功；（2） 电镜显示所合成的磁性胶束呈球形的壳-核结构，DLS 测得所合成的未修饰磁性 胶束与 FA-BSA 修饰磁性 胶束平均水合粒径 分别为 161.5nm（PDI=0.21 ）、 196.1nm(PDI=0.26)；(3)热重分析未修饰磁性胶束与 FA-BSA 修饰磁性胶束的氧 化铁含量分别为 27.5 wt%、19.2 wt%；磁滞回线测得二者的饱和磁化强度分别为 13.9 emu/g、5.5 emu/g；（4）采用多回波 T2WI 磁共振扫描分析测定未修饰的磁 性胶束与 FA-BSA 修饰的磁性胶束的横向弛豫率分别为 243.9 mM-1s-1 、179.5 mM-1s-1。 3.体外细胞实验：（1）MTT 法检测不同浓度两种磁性胶束（从 25 μg/mL 到 100 μg/mL）与正常肝细胞孵育 24，48h，细胞活性均在 80%以上，说明两种磁性胶 束没有细胞毒性，可应用于生物医学；（2）细胞摄取实验，无论是叶酸受体阳性 的 Bel-7402 细胞，还是叶酸受体阴性的 Hep3B