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发酵液的预处理技术 1、概述 预处理的原理和方法 发酵液预处理的主要目的: ① 改变料液的性质,加快悬浮液中固形物沉降的速率。 ②去除发酵液(培养液)中部分杂质,以利于提取和精制后继各工序的顺 利进行。 ②相对纯化。 *发酵液预处理的主要包括: ①发酵液过滤特性的改变; 一、概述 二、发酵液预处理的原理与方法 1. 降低液体黏度 2. 调整pH 6. 加入反应剂 5. 加入助滤剂 3. 凝聚 4. 絮凝 加水稀释法 1. 降低液体黏度 加热法 此法是发酵工业中发酵液预处理较常用的方法之一,方法简单 有效、成本低廉。 如利用酸碱性来调节pH值使蛋白质等两性物质达到等电点得以除去。又如过滤中,发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附,通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质,即可减少堵塞和污染。 2. 调整pH 采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态,使其聚结成较大的颗粒,便于提高过滤速率。常用于菌体细小而且粘度大的发酵液的预处理。 凝聚与絮凝 凝聚——是指在某些电解质作用下,破坏细胞,菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,使胶体粒子聚集的过程。 3、凝聚 3.1 概念 (1)发酵液中细胞、菌体或蛋白质分子大小已达到胶体质点范围(颗粒直径在1~100nm之间),具有较大表面积。 (2)胶体粒子的表面在同种溶液中带有相同的电荷,使得这些胶体粒子之间相互排斥,保持一定距离而不互相凝聚。 (3)胶体粒子表面带有许多极性基团,这些基团与水具有高度的亲和性,吸附水分子,形成一层水膜,从而是胶体粒子呈分散状态。 3.2 原理 阳离子对带负电荷的凝胶凝聚能力的次序为: Al3+Fe 3+ H+ Ca2+ Mg2+ K + Na + Li + 无机盐类: 金属氧化物类: Al2(SO4)3.18H2O 、AlCl3.6H2O、FeCl3 、 ZnSO4 、 MgCO3等 Al(OH)3、 Fe3O4 、 Ca(OH)2或石灰等 3.3 常用的凝聚剂 絮凝——指使用絮凝剂(通常是天然或合成的大相对分子质量物质),在悬浮离子之间产生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。 4、絮凝 4.1 概念 絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物,其相对分子质量可高达数万至 一千万以上,长链状结构,其链节上含有许多活性官能团,包括带电荷的 阴离子(如---COOH)或阳离子(如---NH2)基团以及不带电荷的非离子 型基团。 它们通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。 当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上,产生桥架 连接时,就形成了较大的絮团,这就是絮凝作用。 4.2 原理 絮凝作用示意图 1)有机高分子聚合物,如聚丙烯酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物; 2)无机高分子聚合物,如聚合铝盐、聚合铁盐等; 3)天然有机高分子絮凝剂,如聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖、脱乙酰壳多糖等。 工业上使用的絮凝剂可分为三类: 4.3 常用的絮凝剂 聚丙烯酰胺絮凝剂 目前最常见的高分子聚合物絮凝剂: 有机合成的聚丙烯酰胺类和聚乙烯亚胺衍生物 聚丙烯酰胺类絮凝剂的优点 用量少,一般以mg/L计量; 絮凝体粗大,分离效果好; 絮凝速度快; 种类多,适用范围广。 聚丙烯酰胺类絮凝剂的缺点 存在一定的毒性,特别是阳离子型聚丙烯酰胺,用于食品和医药工业时应谨慎。 对于非离子型和阴离子型高分子絮凝剂,要采用凝聚和絮凝双重机理才能提高过滤效果,这种包括凝聚和絮凝机理的过程,称为混凝。 混凝 对于带负电荷的菌体或蛋白质来说,采用阳离子型高分子絮凝剂同时具有降低胶粒双电层电位和产生吸附桥架的双重机理; 5. 加入助滤剂 助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。 常有的助滤剂有硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、白土、炭粒、淀粉等,最常用的是硅藻土。 助滤剂的使用方法有两种:一种是在过滤介质表面预涂助滤剂,另一种是直接加入发酵液。也可两种方法同时使用。 硅藻土 石棉粉 6. 加入反应剂 新生霉素发酵液: 3CaCl2+2Na3PO4=Ca3(PO4)2 +6NaCl 环丝氨酸发酵液: 3CaO+2H3PO4=Ca3(PO4)2 +3H2O * * * * * *
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