如何正确理解自身抗体实验室检测结.ppt

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对于自身抗体滴度与疾病的相关性 有些自身抗体是高特异性指标。如抗Sm抗体对SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体对AIH等,一旦出现阳性(即使是低滴度),基本上就可做出诊断。但如果这些指标为阴性,也不能排除相关疾病的存在。 相反有些指标虽然在疾病中的阳性率比较高,但特异性差,在很多疾病甚至健康人群中均可出现阳性(如ANA),这种抗体只有在高滴度时,才对相关疾病有诊断意义。 自身抗体的滴度不仅对疾病诊断非常重要,并且有些抗体的滴度(如抗dsDNA抗体)与疾病的活动度密切相关,可用于疗效和病程监控 。 抗核抗体(ANA)滴度的意义 检测ANA的标准方法为间接免疫荧光(IIF)法,最好用Hep-2细胞和灵长类肝冰冻组织切片作为检测基质。其起始稀释度为1:100,滴度超过1:320时,则提示自身免疫性疾病。 由于不同检测系统的起始稀释度和滴度系统不同,检测到的滴度数值不能直接进行比较。对ANA的结果不仅要关心其定性和滴度结果,同时还应了解所用检测系统的实验基质和起始稀释度(正常参考范围)。 抗核抗体(ANA)滴度的意义 1:100 ANA阴性,血清标本中未检出抗核抗体。 1:100(+)可疑阳性,继续追踪观察。少数正常人群(3-15%)也可能阳性。 1:320+弱阳性,提示可能存在相关疾病。极少数正常人也可能阳性。 1:1000++中等阳性,提示可能存在相关疾病。 1:3200+++强阳性,高度提示存在相关疾病。 1:10000++++很强的阳性,高度提示存在相关疾病。 自身抗体不同的检测方法对结果的影响 抗dsDNA抗体是SLE最常见的自身抗体,抗体水平变化与疾病活动性变化高度一致,准确定量检测抗dsDNA抗体对检测SLE病情价值最大。 实验室检测抗dsDNA抗体应首选敏感性高的检测方法(如ELISA)筛查。对疑似患者可以使用特异性最高的检测方法(如IIF法)辅助确认。 不同的检测方法学之间存在敏感度和特异性的差异 为何患者ANA阳性,却无明显临床症状? ANA阴性结果提示患者体内不存在抗核抗体。若患者仅仅出现ANA阳性结果而无其他临床表现或指征,则并不提示自身免疫性疾病。 为何患者ANA阳性,却无明显临床症状? 1)ANA在健康人群中的阳性率约为3-15%,而且ANA的产生与患者的年龄相关,年龄在65岁以上的健康人群ANA阳性率可高达10-37%.另外健康人群在感染病毒的情况下,也可能出现ANA阳性,但这些抗体多为短暂出现。 2)一些药物治疗可能引起ANA阳性。因此ANA阳性需结合患者用药情况综合判断。 3)一些特殊疾病(如肿瘤)也可能导致ANA阳性。 为何患者ANA阳性,却无明显临床症状? 目前已有的研究表明,自身抗体往往早于临床症状出现。对于SLE患者而言,至少有一种以上SLE相关自身抗体在临床诊断前即已出现(最早达9.4年前,平均为3.3年),而且抗体与疾病特异性越高,出现的时间越晚。另外,随着SLE病情进展,抗体产生的数量逐渐增加。 单独出现Ro52抗体阳性是否具有临床意义? 目前已有的研究表明,抗SSA抗体主要提示干燥综合症、SLE和新生儿红斑狼疮等疾病。但Ro52抗体在许多疾病中(如风湿性疾病、感染性疾病和自身免疫型肝病等)均有一定的发生率,因此单独Ro52抗体阳性结果缺乏疾病,需结合其他检测指标或临床症状综合判断。例如自身免疫性肝炎患者出现SLA/LP抗体和Ro52抗体同时阳性,则提示患者病情较重、预后较差。 如何认识荧光法ANA阴性,而印迹法靶抗原(SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等)结果阳性的实验结果? 应根据靶抗原的实际结果,进行具体情况具体分析。 SSA和Jo-1抗原 由于SSA和Jo-1抗原在真核细胞中的表达量不高,而且细胞固定剂对于抗原结构也可能产生影响,因此基于培养细胞作为基质的间接免疫荧光法绝非抗SSA和Jo-1抗体的最佳检测方法。 如何认识荧光法ANA阴性,而印迹法靶抗原(SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等)结果阳性的实验结果? 抗线粒体M2抗体 抗线粒体M2抗体对PBC疾病的诊断具有良好的敏感性和特异性。有研究表明临床明确诊断的PBC患者样本,即使应用大鼠肾检测抗线粒体M2抗体也可能出现荧光法阴性而重组抗原方法阳性的结果。 如何认识荧光法ANA阴性,而印迹法靶抗原(SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等)结果阳性的实验结果? dsDNA抗体 对于dsDNA抗体临床检测,由于不同实验体系中所应用的抗原来源不同、抗原呈现形式不同以及反应条件不同等因素的影响,因此不同实验方法学之间的结果并不具备可比性。 自身抗体流行病学 自身抗体流行病学资料的

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