浙大生物化学教学课件5：核酸.pptxVIP

生 物 化 学浙江大学生命科学学院江 辉第五章 核苷酸和核酸第一节 碱基、核苷和核苷酸第二节 磷酸二酯键与多核苷酸第三节 碱基的性质和核酸结构第四节 DNA结构第五节 RNA结构第六节 核酸的变性、复性和杂交 第七节 核酸的化学反应和酶学修饰第八节 核酸酶和DNA限制性内切酶第九节 DNA一级结构测定第十节 染色质结构核酸的研究历史1868年，瑞士外科医生Fridrich Miescher从脓细胞核中分离到核酸样物质。核酸分为DNA和RNA。DNA存在于细胞核和线粒体内，RNA存在于细胞质和细胞核内。1944年，Oswald Avery通过肺炎双球菌转化实验证实了DNA是遗传的物质基础。DNA是遗传的物质基础核酸的重要性DNA是遗传物质，是遗传信息的载体： DNA→ RNA→蛋白质（中心法则）DNA以自身的半保留复制方式把遗传信息一代一代传递下去；核酸的研究在医学、农学等生命科学中发挥重要作用；基因工程进行的DNA重组，将创造出自然界原来没有的新品种。核酸核苷酸磷酸核苷核糖嘌呤碱基戊糖嘧啶 脱氧核糖第一节 碱基、核苷和核苷酸核酸是一种线形多聚核苷酸。核酸在核酸酶作用下水解为核苷酸，所以核酸的基本单位是：核苷酸。核苷酸由碱基、戊糖和磷酸组成。碱基+戊糖核苷 + 磷酸核苷酸核酸核苷酸之间通过3?,5?-磷酸二酯键连接一、碱基嘧啶碱在嘧啶2位碳原子上由酮基取代H，4位碳原子上有氨基或酮基取代H胸腺嘧啶5-甲基尿嘧啶Thymine（T）尿嘧啶Uracil（U）胞嘧啶 Cytosine（C）嘧 啶pyrimidine稀有的嘧啶碱胞嘧啶尿嘧啶5-甲基胞嘧啶5-羟甲基胞嘧啶5,6-双氢尿嘧啶假尿嘧啶嘌呤碱在嘌呤2位或6位碳原子上H被氨基或酮基取代嘌 呤(purine)腺嘌呤 6-氨基嘌呤Adenine（A）鸟嘌呤 2-氨基6-氧嘌呤Guanine（G）稀有的嘌呤碱N6-甲基腺嘌呤N2-甲基鸟嘌呤7-甲基鸟嘌呤在DNA和RNA中都有腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）。胸腺嘧啶（T）只出现在DNA分子中。尿嘧啶（U）则只出现于RNA分子中。嘌呤、嘧啶环上由于有共轭双键，在260nm波长附近对紫外光有较强的吸收。嘌呤嘧啶核糖磷酸DNAA，GC，T脱氧核糖磷酸RNAA，GC，U核糖磷酸二、核苷由核糖和碱基之间以糖苷键（C-N糖苷键）缩合而成。连接方式是嘌呤环上的N-9或嘧啶环上的N-1与糖的C-1以糖苷键相连。 β-构型（1位羟基在环的上面）。?核糖核苷：腺嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷、胞嘧啶核苷、尿嘧啶核苷脱氧核糖核苷：腺嘌呤脱氧核苷、鸟嘌呤脱氧核苷、胞嘧啶脱氧核苷、胸腺嘧啶脱氧核苷腺嘌呤核苷（腺苷）核苷 = 核糖 + 碱基假尿嘧啶核苷：核糖与尿嘧啶第5位碳原子形成C-C糖苷键尿嘧啶核苷假尿嘧啶核苷核糖和脱氧核糖核苷酸中核糖和脱氧核糖都采取β-呋喃型结构三、核苷酸核苷中的戊糖羟基（主要是5位）被磷酸酯化，形成核苷酸。 核糖核苷酸：腺嘌呤核苷酸（AMP）鸟嘌呤核苷酸（GMP）胞嘧啶核苷酸（CMP）尿嘧啶核苷酸（UMP） 脱氧核糖核苷酸：腺嘌呤脱氧核苷酸（dAMP）鸟嘌呤脱氧核苷酸（dGMP）胞嘧啶脱氧核苷酸（dCMP）胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP）核苷酸 = 核苷 + 磷酸 RNA的核糖在2、3、5位上都有一个自由羟基，能各自被磷酸酯化； DNA的脱氧核糖在2位上没有羟基，故只有3 、5能被磷酸酯化。四、多磷酸核苷酸核苷与一个磷酸产生磷酸酯化的核苷酸，称为核苷单磷酸（NMP）；核苷单磷酸进一步磷酸化，形成核苷二磷酸（NDP）和核苷三磷酸（NTP）。AMPADPATP五、核苷酸的生物学功能1、提供能量磷酸之间的焦磷酸键含有很高的能量，称为高能键（~），是生物体内能量利用和贮存的主要物质（30 kJ/mol）。核苷二磷酸：ADP、GDP、CDP、UDP核苷三磷酸：ATP、GTP、CTP、UTP脱氧核苷二磷酸：dADP、dGDP、dCDP、dTDP脱氧核苷三磷酸：dATP、dGTP、dCTP、dTTP2、辅因子的结构成分3、信号分子3,5-环状腺苷酸，cAMP由腺苷酸上磷酸与核糖的3，5碳原子形成双酯环化而成。由腺苷酸环化酶催化ATP脱去一分子焦磷酸而环化成cAMP；它又可被专一性的磷酸二酯酶水解成AMP。第二节 磷酸二酯键与多核苷酸DNA和RNA中核苷酸的顺序都是从5到3，即核苷酸的3-羟基通过磷酸二酯键与下一个核苷酸的5-羟基相连。蛋白质中氨基酸的顺序是N-端到C-端，对应编码它的DNA/mRNA的5到3。DNA和RNA在pH7时带负电荷AATCCGPPPPPPP5OH3pApCpTpCpGpA5AGCUACTCGA532OHOHOHOH33PPPPP55RNADNARNA碱性环境下的降解第三节 碱基的性质和核酸结构