生物学2-3实验.pptVIP

* * 实验二 普通光学显微镜的结构和使用 [目的要求] (1)熟悉显微镜的结构和各部件性能。 (2)掌握低倍镜、高倍镜的正确使用方法，熟悉油镜的使用方法 [实验原理] 成像原理：标本置于聚光器与物镜之间，目镜、物镜、聚光器各自相当于一个凸透镜。平行的光线自反射镜折射入聚光器，光线经聚光器集聚增强，照射在标本上。标本的像经物镜放大成像于目镜的焦点之内，但像是倒像。目镜将此倒像进一步放大成像于人眼的视网膜上。因此，当我们观察实验标本时，所看到的最后物象是经过2次放大的、方向相反的倒立的虚象。 [实验用品] (1)器材：普通光学显微镜、擦镜纸、装片 显微镜的类型：光学显微镜和电子显微镜 光学显微镜：分为复式和单式2种显微镜。 单式显微镜：由一组（一个或几个）透镜组成，放大倍数在10倍（放大镜）—200倍以下（解剖显微镜） 。 复式显微镜：由二组以上的透镜组成，放大倍数最大为1250倍，最高分辨力为0.2um。 电子显微镜：放大倍数80—120万倍，分辨力为2埃，比光学显微镜提高1000倍。 (一)普通光学显微镜的构造 光学显微镜由三部分组成：机械部分、光学部分和照明部分 1、机械部分 (1)镜座；显微镜的基座。起稳定和支持整个镜身的作用。有的显微镜在镜座内装有照明光源等构造。 (2)镜柱：连接镜座和镜臂的短柱。 (3)镜臂，镜柱上方弯曲部分，支持镜筒和镜台，拿镜时手握此臂。镜筒直立式光镜在镜臂和镜柱之间有一可活动的关节叫倾斜关节，可使镜臂作适当倾斜，便于观察。但使用时倾斜度一般不应超过45C0，以免失去重心而翻倒。镜筒倾斜式显微镜由于镜臂和镜柱连为一体，故无此关节。 (4)镜筒：位于镜臂前方的圆筒，上端安装目镜，下端装有旋转盘。根据镜筒的数目，光镜可分为单筒式和双筒式两类，单筒式又分直立式和倾斜式两种，而双筒式的镜筒均为倾斜的。 (5)载物台：在镜筒下方，方形或圆形，放玻片标本用。载物台中央有一圆形通光孔，两旁各有一压片夹。有的载物台上装有标本移动器，移动器上装有弹簧夹，用于固定标本片。移动器的一侧有两个旋钮，转动旋钮可使玻片前后左右移动。 (6)物镜转换器(旋转盘) ：圆盘状，在镜筒下方，其上装有3～4个放大倍数不同的物镜。旋转物镜转换器可更换物镜。物镜转换器的内缘有一“T”形卡，用于对准和固定物镜位置，使物镜和光轴同心(合轴)。 (7)调节器；组装在镜臂前方或镜柱两侧的一对大小旋钮，为调节焦距之用。 大旋钮为粗调节器，转动粗调节钮可使镜筒(或载物台)升降，调节焦距。旋转一周可使镜筒(或载物台)升降l0mm。一般用于低倍镜调焦。 小旋钮为细调节器，转动细调节钮可使镜筒(或载物台)缓慢升降，每旋转一周约使镜筒(或载物台)升降0.1mm。适用于高倍镜、油镜或分辨物象清晰度调焦。 2．照明部分 (1)反光镜：载物台下方，镜柱前面的一个圆镜。一面为平面，一面为凹面。平面镜聚光力弱，适于强光源和平行光源。凹面镜聚光力强，适用于弱光源或散射光源。反光镜的方位可以随意调节。 (2)聚光器：在载物台下方，由一组透镜组成，可使反射光线聚集于标本上。一般在镜柱一侧有一旋钮，可使聚光器升降，和物镜配合使用。 (3)光圈：在聚光器下方，由一组活动金属片组成，构成一个可开可缩的孔。在其外侧有一小柄，可以调节控制光线通过。在光圈的下方常装有滤光片架，可以放置不同颜色的滤光片。 3．光学部分 (1)目镜：短圆筒状，装在镜筒上端，其上刻有放大倍数，每台显微镜常备有3～4只放大倍数不同的目镜，如5X、l0X、15X等。眼睛通过目镜观察物像。 (2)物镜：装在物镜转换器上的一组镜头，一般有低倍镜、高倍镜、油镜三种。每个物镜上刻有相应的标记。低倍镜筒上刻有l0X或15X等标志，高倍镜筒上刻有40X或45X标志。油镜上一般为100X。 N.A表示镜口率，镜口率反映镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨力越高。 25 65 注：分辨力：也叫分辨率或分辨本领，指能把两个物点分开的最小距离的能力。这两点之间的距离即为其分辨力，这个距离越近，其分辨率越高。显微镜的分辨力依下列公式来算： R＝0.6l入／N.A (N.A＝n·sinS) 上式中R为分辨力，N.A为镜口率，n为介质的折射率，sinS为透镜视锥半顶角的正弦，入为光波波长。 放大倍数的计算： 实物放大倍数＝物镜放大倍数X目镜放大倍数 （二）显微镜的使用方法 1、低倍镜的使用 (1)检查：右手握镜臂，从镜箱内取出显微镜，左手托镜座，轻轻放在实验桌上。先检查一下显微镜各部件有无损坏，如发现有损坏或性能不良者，立即报告教师请求处理。