Gleevec诱导顺铂耐药卵巢癌细胞COC1凋亡的形态学研究.docVIP

Gleevec诱导顺铂耐药卵巢癌细胞COC1凋亡的形态学研究 【摘要】目的探讨Gleevec对顺铂耐药卵巢癌细胞COC1的诱导凋亡作用。方法用Gleevec处理COC1细胞，采用MTT法检测Gleevec联合顺铂对细胞增殖的影响。HE染色显微镜下观察细胞，电镜下观察细胞形态学的变化。结果Gleevec显著提高了COC1/DDP对顺铂的敏感性(P0．05)；2.5～10 μg／ml顺铂与1.0 μmol/L Gleevec合用表现为协同作用, 2.5～10 μg／ml顺铂与2.5～10 μmol/L Gleevec合用表现为相加作用。在Gleevec的作用下COC1细胞呈现明显的凋亡改变，形成凋亡小体。结论Gleevec能够诱导顺铂耐药卵巢癌细胞COC1的凋亡。 　 【关键词】 Gleevec顺铂卵巢癌耐药 Study and Investigation about the effect of Gleevec on induction of apoptosis in Ovarian Cancer cell ZHENG Yi, et al. Harbin Medical Univeristy, Harbin, Heilongjiang 150086 China 【Abstract】 Objective The study was designed to investigate the effect of Gleevec on induction of apopto sis in Ovarian Cancer cell. Methods MTT assay was used to analyze inhibitory effect of Gleevec and with DDP on COC1 cell. The changes of apoptosis were observed with HE staining invertmicroscope and transmission electron microscope.Results Gleevec enhanced COC1/DDP cells sensitivity to DDP significiantly (P0.05);2.5～10 mu;g/ml DDP with 1.0 mu;mol/L Gleevec performanced the function of conjunction,2.5～10 mu;g/ml DDP with 2.5～10 mu;mol/LConclusions The Gleevec can induce the apoptosis of drug-resistant ovarian tumor cell enhance the apoptosis of drug-resistant ovarian carcinoma cell induced by DDP. 【Key words】 Gleevec DDP Ovary cancer Drug resistance 细胞凋亡是一种与细胞坏死具有不同形态及生化特征且受基因调控的主动性细胞死亡。恶性变是肿瘤细胞丧失自发凋亡反应能力的最终结果, 和耐药与凋亡减少有关。因此诱导耐药肿瘤细胞产生凋亡更有价值。本研究以卵巢癌细胞系COC1的耐铂类亚株COC1/DDP为研究对象来探讨Gleevec诱导卵巢癌耐药细胞凋亡的作用机制。为临床提高耐药卵巢癌的治疗效果提供实验依据。 1 材料与方法 1．1 材料 COC1/DDP细胞株购自武汉大学中国典型培养物保藏中心, 由中国医学科学院肿瘤研究所建株;Gleevec购自瑞士诺华公司;DDP购自江苏豪森制药厂;四甲基偶氮哇蓝(MTT) 、二甲基亚砜(DMSO)均为Sigma公司产品;PRMI-1640培养基购自GIBCO公司；电镜（EM208S荷兰飞利蒲）。 1．2 方法 1．2．1 细胞培养及实验分组 COC1/DDP细胞株在含有10%胎牛血清、100 U/ml 青霉素、100 U/ml 链霉素、0.5 mu;g/ml DDP的RPMI-1640培养基中,37 ℃、5%CO2混合气体的培养箱中培养。细胞换液为24～48 h,取对数生长期细胞进行实验。 1．2．2 顺铂、Gleevec联合用药对COC1细胞增殖的影响 收集对数生长的细胞，细胞计数密度为1.5times;106/ml,以100 mu;l/孔接种于96孔培养板，37 ℃、5%CO2培养箱培养12 h，以1 500转/min离心10 min,弃去培养液，加入含不同浓度的药物的培养基200 mu;l，顺铂选取0、1.25、2.5、5.0、10 mu;g/ml 5个浓度，Gleevec选取0、0.5