产志贺样毒素大肠埃希菌的分子生物学鉴定.docVIP

产志贺样毒素大肠埃希菌的分子生物学鉴定 中华医学检验杂志 1999年第5期第22卷 论著 作者：朱庆义　李连青　郭兆彪　张敏丽　杨瑞馥　赵瑞珍　周向红 单位：朱庆义　李连青　赵瑞珍　周向红　030013 山西省儿童医院分子微生物室； 郭兆彪　张敏丽　杨瑞馥　军事医学科学院微生物流行病研究所 关键词：大肠杆菌感染；腹泻；聚合酶链反应 　　我们用3′端特异性引物聚合酶链反应(3′BS-PCR)分析原理，将慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清及白细胞内的乙肝病毒(HBV)前C区1 896位点突变的突变型及野生型分离，探讨HBV有意义突变中，最常见的1 896位点突变在外周血白细胞内的存在状态，结合临床进一步阐明乙肝的发病机理。 　　一、材料和方法 　　1.标本来源：经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测及HBV DNA检测均阳性的乙肝患者101例，均为我院1996年2月～1998年2月门诊及住院病例。其中男67例，女34例；年龄7～72岁，平均34.4岁。 　　2.血清及白细胞内DNA提取：血清DNA提取按常规方法进行。白细胞内DNA提取：取200 μl依地酸(EDTA)抗凝血于0.5 ml离心管中离心，弃上清，加白细胞分离液50 μl和双蒸水200 μl混匀，离心并弃上清后，用上法再重复1次。沉淀加入裂解液，置100℃水浴10分钟。 　　3.PCR引物及反应条件：采用文献［1-3］报道的3′BS