催产素对大鼠胃缺血-再灌注损伤的作用.docVIP

催产素对大鼠胃缺血-再灌注损伤的作用 【摘要】目的观察腹腔注射催产素（oxytocin，OT）对胃缺血-再灌注损伤 (gastric ischemia-reperfusion injury，GI-RI )的作用及其可能的机制。方法采用夹闭大鼠腹腔动脉30 min，松开动脉夹血流复灌1 h，制备胃缺血-再灌注损伤模型；将SD大鼠随机分为12组，每组6只；4组腹腔注射0.5 ml生理盐水和0.5 ml 4, 20, 100 μg / 0.5 ml剂量的OT；1组腹腔注射200 μg / 0.5 ml 阿托西班（atosiban，OT特异性阻断剂），1组等剂量atosiban注射10 min后给予100 μg / 0.5 ml OT；另取4组分别进行迷走神经切除、交感神经切除以及迷走神经切断+100 μg / 0.5 ml OT腹腔注射和交感神经切除+100 μg / 0.5 ml OT腹腔注射；这10组均进行缺血再灌注，计数胃黏膜损伤指数（gastric mucosal damage index，GMDI）。剩余2组分别给予0.5 ml生理盐水和100 μg / 0.5 ml OT，采用幽门结扎法收集胃液，测定所得胃液体积和pH值。结果与对照组相比，腹腔注射OT（20, 100 μg / 0.5 ml）后, GI-RI明显减轻，GMDI减少，并能减少胃液排出量和胃酸度（P＜0.05）；特异性拮抗剂atosiban能够翻转OT的保护作用；切断膈下迷走神经或切除腹腔交感神经节后再给予OT, 可进一步减轻GI-RI。结论腹腔注射OT对大鼠GI-RI 具有保护作用; 这种作用可能是由迷走和交感神经介导，通过OT受体发挥的。 【关键词】 催产素；胃缺血-再灌注损伤；胃黏膜损伤指数；迷走神经切断术；交感神经切除术 催产素（oxytocin，OT）主要是在下丘脑视上核和室旁核的大细胞神经元中合成的, 除了使妊娠末期子宫收缩和促进哺乳期排乳的经典作用外, 还具有多种生理功能［1~3］。近年来,OT对于胃肠道的作用受到渐多的关注，有些研究证明微量注射OT至室旁核能够减少胃酸分泌［4］；在外周，反复皮下注射OT能够减少血浆中胃泌素、胆囊收缩素和胰岛素的浓度［5］。 但是脑室注射OT（10 mg/kg）能加重乙醇导致的胃溃疡，而对吲哚美辛导致的胃溃疡没有任何作用［4］；在迷走神经背核外源性注射OT能够增加胃酸分泌［6］。综上所述，看来催产素对于胃肠道功能的调节是很复杂的。 临床上各种原因(诸如门脉高压血管破裂、消化道溃疡及创伤出血等) 都能导致胃缺血-再灌注损伤（GI-RI） , 外周注射催产素对胃缺血-再灌注（GI-R）造成的胃黏膜损伤是否有保护或加重作用，其机制如何，这是值得研究的问题。对此问题的研究有助于为器官缺血-再灌注损伤的临床防治提供新的理论和实验依据,对于拓宽多器官缺血-再灌注损伤的认识也具有一定意义。 1 材料和方法 1.1 实验动物 成年健康的Sprague-Dawley（SD） 雌性大鼠(220～240 g) , 由徐州医学院实验动物中心（使用许可号：SYXK［su］ 2002-0038）提供。将SD大鼠随机分为12组，每组6只；4组腹腔注射0.5 ml生理盐水和0.5 ml 4, 20, 100 mu;g / 0.5 ml剂量的OT；1组腹腔注射200 mu;g / 0.5 ml 阿托西班（atosiban，OT特异性阻断剂），1组等剂量atosiban注射10 min后给予100 mu;g / 0.5 ml OT；另取4组分别进行迷走神经切除、交感神经切除以及迷走神经切除+100 mu;g / 0.5 ml OT腹腔注射和交感神经切除+100 mu;g / 0.5 ml OT腹腔注射；这10组均进行缺血-再灌注，计数胃黏膜损伤指数（gastric mucosal damage index，GMDI）。剩余2组分别给予0.5 ml生理盐水和100 mu;g / 0.5 ml OT，采用幽门结扎法收集胃液，测定所得胃液体积和pH值。 1.2 试剂 OT： 上海第一生化药业有限公司；atosiban：深圳翰宇生物工程有限公司；其他试剂均为国产分析纯。 1.3 方法 1.3.1 GI-RI动物模型的制备 按Wada等［7］方法进行。实验大鼠戊巴比妥钠麻醉后, 仔细分离腹腔动脉与周围组织后, 用小动脉夹夹闭腹腔动脉，30 min 后去除动脉夹恢复血流再灌注60 min。实验结束后取胃，行GMDI的测量，并保留组织，以进行后续指标测定。 1.3.2 膈下迷走神经切断 参照Mordes等［8］方法, 打开腹腔后, 在距贲门5 mm 处的食管前后壁,切断迷走神经前、后支。手术结束进行缺血-再灌注。 1.3.3 腹腔交感神经节切