免疫组织化学检测子宫颈癌盆腔淋巴结隐匿转移的探讨.docVIP

免疫组织化学检测子宫颈癌盆腔淋巴结隐匿转移的探讨 中华妇产科杂志 2000年第6期第35卷 论著摘要 作者：应晔　高永良　倪型灏　孙文勇　张谷 单位：应晔（310022 杭州，浙江省肿瘤医院妇瘤科）；高永良（310022 杭州，浙江省肿瘤医院妇瘤科）；倪型灏（310022 杭州，浙江省肿瘤医院病理科）；孙文勇（310022 杭州，浙江省肿瘤医院病理科）；张谷（310022 杭州，浙江省肿瘤医院病理科） 　　盆腔淋巴结转移是影响宫颈癌预后的重要因素。常规病理检查有一部分阳性淋巴结未能被检出，称之为隐匿转移。单克隆抗细胞角蛋白［cytokeratin (AE1/AE3),CK］、抗上皮膜抗原(EMA)能检测乳腺癌患者腋淋巴结的隐匿微小转移癌［1］。宫颈癌属上皮来源，CK检测对宫颈癌淋巴结转移的价值如何，文献报道极少。本研究探讨CK、EMA单克隆抗体对检测宫颈癌盆腔淋巴结隐匿转移的价值。 　　一、资料与方法 　　1. 研究对象： 选自1990年～1992年我院行根治性子宫切除加盆腔淋巴结清扫术的临床Ⅰb期及Ⅱa期宫颈癌患者33例。平均年龄53岁（31～70岁）。5年内死亡者15例，其中淋巴结阳性7例，阴性8例；存活5年以上者18例，其中淋巴结阳性3例，阴性15例。鳞癌28例，腺癌5例；病理分化程度：高分化2例，中分化24例，低分化 7例。 　　2. 方法： 所有病理切片均重新复核。对盆腔淋巴结行5 μm的连续切片，在同一切片上除苏木精和伊红（HE）染色外，应用免疫组织化学（免疫组化）EnVision法［2］对33例患者的503个淋巴结分别行CK（1∶50）及EMA（1∶50）抗体免疫组化检测。第一抗体和EnVision System复合物由美国DAKO公司提供。判断标准:肿瘤细胞浆内或细胞膜上见棕黄色颗粒者为阳性显色瘤细胞，根据阳性显色瘤细胞数量的多少分为，阴性: 瘤细胞无阳性显色；阳性：1%～50%瘤细胞呈阳性显色；强阳性：≥50%的瘤细胞呈阳性显色。 　　3.统计方法：两个样本率的比较采用U检验。 　　二、结果 　　33例患者中，10例常规HE染色检查呈阳性的43个盆腔转移淋巴结中，CK及EMA染色均呈阳性；HE染色检查阴性的460个无转移淋巴结中，有3个淋巴结CK及EMA同时呈阳性（隐匿转移），占0.7% （3/460）。3个有隐匿转移的淋巴结分别属于3例患者，其中1例存在其他淋巴结HE染色检查阳性者，2例为HE染色阴性，即CK、EMA检出2例隐匿转移患者。3例淋巴结有隐匿转移者中，1例CK及EMA均呈强阳性，2例CK呈强阳性，而EMA呈阳性。CK及EMA抗原的阳性表达率为36.4%(12/33例)；隐匿转移的阳性表达率为8.7%(2/23例)。3例淋巴结有隐匿转移者中，2例为中分化鳞癌，1例为低分化鳞癌；隐匿转移癌组织2例位于淋巴结边缘窦，1例在淋巴结副髓质区，为微小癌灶或单个癌细胞。5例腺癌中，均未发现隐匿转移。33例患者均随访5年以上，盆腔淋巴结阳性者（包括隐匿转移2例）5年生存率为25%（3/12例），隐匿转移患者2例，5年内均死于盆腔复发；盆腔淋巴结阴性者5年生存率为57%（12/21例），两者比较，差异无显著性（P＞0.05）。 　　三、讨论 　　1.检测宫颈癌盆腔淋巴结有无转移的重要性： 宫颈癌盆腔淋巴结有、无转移患者的5年生存率分别为45%和90%［3］。Yeh等［4］报道，临床Ⅰb和Ⅱa期宫颈癌中，无淋巴结转移者5年生存率为81%，有转移者为53%，单个淋巴结转移较多个转移者生存时间长。对淋巴结有转移的患者术后辅助放射治疗可减少盆腔复发，提高治愈率，因而成为常规治疗。但盆腔淋巴结无转移者仍有一定的复发率，探讨其与预后有关的因素，将有助于识别淋巴结阴性却具有复发、转移可能的高危患者。对高危者，术后辅助放射治疗将进一步提高生存率，而对低危者则可避免不必要的过分治疗及可能带来的毒副反应。因此，检测宫颈癌盆腔淋巴结有无转移至关重要。 　　2.检测CK及EMA对宫颈癌盆腔淋巴结隐匿转移的价值： 目前，宫颈癌盆腔淋巴结转移的诊断主要根据HE染色后组织切片的病理形态特点（即癌细胞的异型性）进行判断，有一定局限性和主观性，尤其当细胞异型性不明显或癌灶较小时，极难识别，常造成误诊或漏诊［5］。近年来，采用免疫组化检测肿瘤根治手术后标本的淋巴结，使用高度特异性和高效价的抗体检测相应抗原，使癌细胞染成特殊颜色而明显区别于背景淋巴结，提高了显微镜检查对癌细胞的识别力，甚至可以识别单个癌细胞，故能提高隐匿转移的检出率。曾有对比研究发现，HE染色仅可检出≥50个细胞的微小转移癌灶，而CK抗体则敏感性更高［6］。另有报道，HE染色发现的转移淋巴结，通过CK抗体均可检出，而多数单个癌细胞或非常小的癌灶的转移，HE染色却无法检出，常需通过C