大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用.docVIP

大鼠胚胎小脑提取液对体外培养小脑神经细胞的作用 山西医药杂志 2000年第5期第29卷 实验研究 作者：章培军　吕捷　吕永利 单位：章培军(大同医学高等专科学校 037008)；吕捷(首都医科大学北京市神经科学研究所)；吕永利(中国医科大学) 关键词：靶源性神经营养因子；小脑提取液；胎龄；细胞培养；小脑 　　【 摘　要 】　目的　观察不同胎龄大鼠小脑提取液(cerebellum extracts,CE)对 体外培养小脑神经细胞的影响。方法　制备不同蛋白浓度的14、16、18、20 d胎鼠(E14、E16、E18、E20)及新生1 d鼠(P1)CE，加入原代培养的E18胎鼠小脑神经细胞中 ，24 h后以微量快速自动比色法检测细胞活性。结果　实验组各胎龄CE均能 促进培养小脑神经元的存活，并有蛋白浓度依赖关系，各胎龄都有各自不同的最适浓度，E1 6和E18CE显示了更强的神经营养活性，与对照组及其他实验组相比差异有极显著性(P＜0.001)。结论　CE对培养小脑细胞具有高度神经营养活性。 Effect of cerebellum extracts from embryonic rat on cultured cerebellar neurons Zhang Peijun,Luuml; Jie,Luuml; Yongli 　　(Datong Medical College,Datong,037008,China) 　　【 Abstract 】　Objective　The effects of cerebellum extracts (C E) from different embryonic ages on cultured rat cerebellar neurons were studied .Method　CE from 14 d,16 d,18 d,20 d embryonic rats (E14～20) an d P1 newborn rat were made into different concentrations on protein,then were ad ded to cultured cerebellar neurons of E18 rats.The neuronal survival was determi ned by the autocolorimetric assay.Results　The data showed that CE of all experimental ages could promote the survival of cerebellar neurons and there was a concentration-dependent relation on protein;each age had its respe ctive optimun protein concentration,E16 and E18 CE showed more prominent neurotr ophic activities,making a significant difference (P＜0.001) cempared with the control and other experimental groups.Conclusion 　The rat cerebellum extract (CE) has a powerful trophotropic effect on th e cultured cerebellar neurons. 　　【 Key words】　Target-derived neurotrophic factors;　Cerebellu m extracts;　Embryonic age;　Cell culture;　Cerebellum 　　神经营养因子(neruotrophic factors,NTFs)能维持发育神经元的存活和分化，促进受损伤 神经元的修复与再生。受损伤神经元的长期存活及功能恢复还有赖于这些神经元的靶细胞提 供的相对特异的靶源性神经营养因子(target-derived neurotrophic factors,TNTFs) ［1］。目前已从组织提取液中提出多种特异性TNTFs［2，3］。小脑是重要的运动 中枢，已发现有多种TNTFs及其受体在表达，但以小脑为靶器官提供的特异TNTFs还未见报道 。我们设想，除了非特异性TNTFs以外，小脑神经细胞在胚胎发育中也可能合成分泌某些特 异的TNTFs，诱导自身神经元轴突的生长，从而建立特异的神经通路联系。为此，我们制备 不同胎龄小脑提取液，观察了它们对培养小脑神经细胞的作用。 　　1　材料与方