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LOGO 材料学院中心实验室 近代材料分析技术实验课—— 激光扫描共聚焦显微镜 史淑艳 主要内容 激光扫描共聚焦显微镜工作原理 1 激光扫描共聚焦显微镜基本结构 2 金相试样微观形貌观察 3 4 表面粗糙度的测量 光学金相显微镜 利用透镜可将物体的像放大，但单个透镜或一组透镜的放大倍数是有限的，为了得到更高放大倍数的像，光学金相显微镜中装有两组放大透镜，具有二级放大的功能，靠近物体的一组透镜为“物镜”，靠近观察者的一组透镜称为“目镜”，物体上的结构细节经物镜第一次放大后再由目镜作第二次放大。 一、光学显微镜的成像原理： 光学金相显微镜成像原理 光学金相显微镜 二、光学金相显微镜 光学金相显微镜 二、光学金相显微镜——MEF4A 激光扫描共聚焦显微镜 三、激光扫描共聚焦显微镜的发展历史 1957年，Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的 某些基本原理，获得了美国的专利。 1967年，Egger和Petran成功的应用共聚焦显微镜产生了一个光学横断面。 1970年，牛津和阿姆斯特丹同时向科学界推荐了一种新型的扫描共聚焦显微镜。 1978年，阿姆斯特丹大学的G.J.Brakenhoff首次展示了改善了分辨率的共焦显微镜。 1984年，Bio-Rad公司推出了世界第一台共聚焦显微镜商品，型号为SOM-100，扫描方式为台阶式扫描。 激光扫描共聚焦显微镜 三、激光扫描共聚焦显微镜的发展历史 1986年，MRC-500即改进为光束扫描，用作生物荧 光显微镜的共聚焦系统，即后又推出了MRC-600、MRC-600uv、 MRC-1000、MRC-1000uv。 1987年，White和Amos在英国《自然》杂志发表了“共聚焦显微镜时代的到来”一文，标志着LSCM已成为进行科学研究的重要工具。 随后各家公司都推出了商品化的共焦显微镜,英国的Bio-Rad公司的MRC系列，德国Leica公司的TCS系列，Zeiss公司的LSM系列等。随着技术的不断发展和完善，产品的性能不断改进和更新，应用的范围也越来越广泛。 激光扫描共聚焦显微镜 四、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构 显微镜主机 显微镜控制箱 显示器 电脑主机 操控手柄 激光扫描共聚焦显微镜 五、OLS4000激光扫描共聚焦显微镜的基本参数 配备LED光源和405nm短波长半导体激光光源 配备六组物镜和六孔电动物镜转盘 100×100mm超声波电动载物台 放大倍数108×—17200× 水平方向的分辨率为0.12μm，Z轴方向分辨率为0.8μm 观察范围16×16微米-2560×2560微米 激光扫描共聚焦显微镜 六、激光扫描共聚焦显微镜与普通光学显微镜的区别 用激光做光源因为激光的单色性非常好, 光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。 采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差。 采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 六、激光扫描共聚焦显微镜与普通光学显微镜的区别 分辨率（又称“鉴别率” ） 是指物镜具有将两个物点清晰分辨的最大能力。 以两个物点能清晰分辨的最小距离d的倒数表示。 d=kλ/N.A. d为最小分辨距离； λ为入射光的波长； N.A.为物镜的数值孔径。 表明物镜的数值孔径越大，入射光的波长越短，则物镜的分辨能力越高。 OLS4000使用的是405nm短波长半导体激光光源，所以进一步减小了入射光的波长，从而得到更高的分辨率。 金相显微镜的构成 六、激光扫描共聚焦显微镜与普通光学显微镜的区别 视场直径 是指在显微镜下看到的视场内所能容纳被检物体的实际范围。视场直径越大越便于观察。 OLS4000带有图像拼接功能，可以 获得高分辨率宽视野的图像。? 金相显微镜的构成 激光扫描共聚焦显微镜 七、激光扫描共聚焦显微镜的应用—高分辨二维观察 钛合金 铝合金 激光扫描共聚焦显微镜 七、激光扫描共聚焦显微镜的应用—高分辨二维观察 DVD光盘 MSP纳米复合材料 激光扫描共聚焦显微镜 七、激光扫描共聚焦显微镜的应用—高分辨二维观察 珠光体-OLS4000观察 珠光体-M