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病原生物学试验教材实验二 沉淀实验 溶血实验.ppt
电子实验报告内容: 一、原理 二、现象 三、结论 于一周后发Email给班长,班长统一发给我。 chenwei566@zju.edu.cn * 沉淀反应可在溶液中进行,也可在琼脂等凝胶中进行 琼脂凝胶是……,(可溶性抗原、抗体)分子量小于20万,自由扩散; …… 900C…… 400C…… * * * * * An antigen can have several different epitopes or repeated epitopes. * Add sample, about 10μl each well ranges of volumes: P200 = 20-200 μl, Never exceed the upper or lower limits * * * * 医学免疫学实验 陈 玮 Email:chenwei566@zju.edu.cn 医学免疫学实验 一、凝集试验、吞噬试验 二、沉淀试验、溶血反应 三、免疫标记技术、细胞免疫功能测定、 豚鼠过敏试验 四、小鼠脾NK细胞活性测定 实验二 (一)沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验(示教) 2、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验 (二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验(原理) Precipitation reactions in fluids (p. 154) Precipitation reaction can be seen 一定条件 Ag、Ab比例合适 Ag Ab Ag Ag Ag Ag浓度 沉淀环直径2 (一) 沉淀反应 可溶性Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验 (定量) Ag (一)2、双向琼脂扩散试验 (定性或半定量) Ag Ab Ab ? Ag Ab ? Ag Ab ? Ag :标本中无Ag :标本中有Ag (相同抗原?) (在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线) 标本 阳性对照 (fusion) (cross) (spur) αR1αR2 R1,2 Ab ? Ag Ab ? Ag Ab ? Ag :标本中无Ag :标本中有Ag (相同抗原) 标本 阳性对照 (一)2、双向琼脂扩散试验(定性) (请按照实验指导讲义方法进行操作) Ab Ag Ag ? ? ? ? Ab ? Ag 1. Make a agar plate (without Ab or Ag) 2. Punch wells Add samples: Anti-AFP positive control (AFP) Test sample (AFP?) Ab Ag ? sample serum (AFP?) AFP, positive control Anti-AFP Ab Ag Ag ? ? ? ? Ab ? Ag sample serum (AFP?) AFP, positive control Anti-AFP 加样图(1): 加样图(2): sample serum (AFP?) AFP, (positive control) Anti-AFP Ab Ag Ag ? ? ? ? sample serum (AFP?) Anti-AFP 加样图(3): Ab ? Ag AFP, (positive control) Ab ? Ag Ab ? Ag :no Ag(AFP) in sample serum :same Ag(AFP) in sample serum Result (1): 4. incubation and observe results :no Ag(AFP) in sample serum :same Ag(AFP) in sample serum Ab Ag Ag Ag Ag ? ? ? ? Ab Result (2): sample serum (AFP?) AFP, (positive control) Anti-AFP Ab Ag Ag ? ? ? ? sample serum (AFP?) Anti-AFP Result (3): Ab ? Ag AFP,
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