棘球蚴抗原b诱导小鼠皮肤移植免疫逃避的实验分析-experimental analysis of immune evasion induced by echinococcus antigen b in mice skin transplantation.docx

学位论文独创性说明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得 的成果。 据我所知， 除文中已经注 明引用的内容外， 本论文不包含其他个 人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的 研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 研 究 生 签 名 ：时 间 ：年月日学位论文版权授权书 本 人完全了解新疆医科大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有 权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质 版。有权将学位论文用于赢利目的的少量复 制并允许论文进入学校图书馆 被查询。有权将学位论文的内容编 入有关数据进行检索，有权将学位论文 的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后使用本规定。 研究生签名： 时 间 ：年月日导师签名： 时 间 ：年月日前言棘球蚴病(包虫病)是一种分布地域广泛，对人类健康和畜牧业生产损害程度严重 的的人畜共患病，其主以犬为终宿主，人、羊、牛为中间宿主。棘球蚴幼虫生长缓 慢，往往侵入人体后数年才出现症状。宿主与棘球蚴的关系是感染宿主后除了慢性 感染的同时伴有针对于宿主免疫逃避的出现。棘球蚴能够在宿主体内长期存活与有 效地免疫逃避机制密切相关。在棘球蚴寄生于宿主体内时一些因素与成份认为与抑 制宿主免疫应答及诱导免疫逃避有关，主要有三个方面，即包虫虫体、囊壁及囊液。 来源于囊液的抗原 B 是棘球蚴的特异抗原，常用于棘球蚴病的免疫诊断。抗原 B 约 占囊液总内容物的 10%,是一种耐热的 160 kd 蛋白质。免疫组化分析显示,抗原 B 位 于原头蚴的顶突和续绦期生发层,并由此分泌到囊液中。约 90 %的细粒棘球蚴病人和 40%泡球蚴病人有抗该抗原抗体[1].随着研究的深入，越来越多的实验证实：棘球蚴有 效地免疫逃避机制及免疫抑制作用的发挥与抗原 B 有着密切关系。总的来说，抗原 B 干预细胞因子的分泌、诱导 T 淋巴细胞凋亡，甚至影响树突状细胞（DC）的分化、 成熟及功能的发挥，从而导致 TH1/TH2 平衡紊乱，呈现有益于棘球蚴生存的 TH2 状态并得以长期生存。近年来国内外进行一系列实验研究发现抗原 B 在其逃避宿主免疫杀伤及免疫监 视机制中发挥着重要的作用：⑴相关细胞因子与 TH1/ TH2 平衡紊乱：Rigano 等研究 了细粒棘球蚴抗原 B 在免疫逃避并建立慢性感染中免疫学的作用一文中发现抗原 B 明显抑制多形核细胞的聚集,但不影响其随机移动性和有氧代谢。抗原 B 使病人的外 周血单个核细胞(PBMC)产生 IL-4 和 IL-13,不产生 IL-12,产生 γ-IFN 明显低于 PBMC 受囊液刺激后产生 γ-IFN 的水平。抗原 B 使 Th1/Th2 细胞因子比值改变,倾向与免疫 病理相关的 Th2,在进展期的病例中更为明显。由此认为抗原 B 通过抑制多形核细胞 的趋向性在逃避宿主早期免疫应答中起作用[2]；Veridiana Gomes Virginio 在比较棘球 蚴原头节与抗原 B 对健康人嗜中性粒细胞的影响实验中认为：通过分析 CD11b 和 H2O2 认为，抗原 B 虽不影响 CD11b 的表达，但是通过显著提高白介素 8（IL-8）及 降低经血小板活化 PAF 因子预处理的嗜中性粒细胞 H2O2 释放来介导针对宿主的免 疫逃避作用[3]。⑵陈新华在其抗原 B 诱导肝移植后免疫耐受的机制研究中利用人工 重组抗原 B 与人 T 淋巴瘤 Jurkat 细胞共同培养检测细胞内 Ca2 +浓度变化，通过观察 TH1 型的 INF-r 和代表 TH2 型的 LI-4 的表达发现：包虫病人肝脏中抗原 B 的定位和 表达免疫组化结果表明:包虫患者肝组织抗原 B 大量表达，阳性颗粒散在分布定位于 肝细胞浆；抗原 B 刺激包虫病人脾淋巴细胞后可引起 LI4 分泌增高，INF 斗分泌降 低，Thl 向 Th2 漂移。⑶树突状细胞（DC）：Rachele Rigano 等最近关于抗原 B 与树突状细胞的研究中认为：抗原 B 干预宿主 DC 细胞主要通过两条策略：首先损害单核细胞向未成熟 DC 细胞分化，使之不能在炎性刺激物作用成熟。其次影响监测 DC 细胞成熟，启动树突状细胞向有益于其生长的 TH2 状态偏移；再次其下调 CD1a 表达上调 CD86 的表达，CD86 是 CD28 的天然配体，可以促进 TH2 的活化。而且显 著增加 TNF-а、IL-10、IL-6 的表达却唯独下调 TH1 型细胞因子 IL-12p70 的产生，促 进致敏淋巴细胞向 TH2 分化[4].上述研究所示说明抗原 B 在棘球蚴感染宿主后诱导免 疫逃避机制中发挥举足轻重的作用。小鼠是动物实验最常用的一种，主要是由于小鼠属于比较稳定、可靠且基因体 系对照严格清晰的近交系试验动物