急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组d-loop区不稳定性分析-instability analysis of mitochondrial genome d - loop region in acute leukemia and lymphoma.docx

急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究摘要目的：探讨急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究及其临床意义。方法：采用聚合酶链式反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术分析30例急性白血病和30例淋巴瘤患者线粒体基因组的D-loop区HV-1和HV-2两个高变区并测序，结果与剑桥标准序列（rCRS）、mtDB数据库中国汉族人mtDNA序列和同一患者口腔上皮正常组织的序列进行对比，分析其突变情况，采用SPSS11.5统计学软件对数据进行分析。结果：1.急性白血病组（1）30例急性白血病患者，共有20例（66.67%）患者D-loop区发生突变，共检测到59个突变，涉及25个基因位点，新发现突变位点nt16209TC。存在4个不稳定的微卫星结构,即D310（nt303-315C7TC5)、D16184（nt10184-10193C5TC4)、nt203-208(GT)3、nt16388-16391G4。一般预后组共有突变位点nt150CT、D310C7TC5(C8TC6)C7TC6、C9TC5、D16184C5TC4C10、C11，不良预后组共有突变位点nt152TC、nt16311TC、nt16519TC。（2）未治疗组（UT）、部分缓解组（PR）和完全缓解组（CR）3组的突变率分别为2.19×10-3±0.07×10-3、4.37×10-3±1.83×10-3、2.87×10-3±0.81×10-3，单因素方差分析F=5.421,P=0.0150.05；进一步分析LSD-t检验如下：PUT-PR=0.0050.05，差异有统计学意义，PPR-CR=0.0310.05，差异有统计学意义，PUT-CR=0.2990.05，差异无统计学意义。（3）一般预后组和不良预后组对比：突变率分别为3.01×10-3±1.24×10-3，3.55×10-3±1.73×10-3，t=-0.825，p=0.4200.05，差异无统计学意义。（4）突变率与年龄和性别无关。2.淋巴瘤组（1）30例淋巴瘤患者，共有14例（46.67%）患者D-loop区发生突变，共检测到54个突变，涉及31个基因位点,发现8个不稳定的微卫星结构，即D310（nt303-315C7TC5)、D16184（nt10184-10193C5TC4)、nt16259-16262C4、nt16388-16391G4、nt16470-16474G5、nt203-208(GT)3、nt233-241(TAA)3、nt353-356C4。（2）未治疗组（UT）、部分缓解组（PR）和完全缓解组（CR）3组的突变率分别为3.28×10-3±1.55×10-3、6.12×10-3±2.52×10-3、3.28×10-3×10-3±0.77×10-3，单因素方差分析F=4.093,P=0.0470.05；进一步分析LSD-t检验如下：PUT-PR=0.0370.05，差异有统计学意义，PPR-CR=0.0280.05，差异有统计学意义，PUT-CR=1.000.05，差异无统计学意义。（3）一般预后组和难治复发组比较：突变率分别为4.26×10-3±1.82×10-3，4.37×10-3±3.22×10-3，t=0.82，p=0.9360.05，差异无统计学意义。（4）突变率与年龄和性别无关。结论：1.急性白血病组和淋巴瘤组线粒体基因组D-loop区中均存在较高的突变率,具有较强的不稳定性。2.化疗可能增强D-loop区基因的不稳定性。3.D-loop区突变率可能与急性白血病、淋巴瘤病情缓解而降低。4.nt150CT、D310C7TC5(C8TC6)C7TC6、C9TC5、D16184C5TC4C10、C11、nt152TC、nt16311TC、nt16519TC可能与急性白血病预后有关。关键词：急性白血病淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性THEMITOCHONDRIALDNAD-LOOPREGIONINSTABILITYINACUTELEUKEMIAANDLYMPHOMAAbstractObjective:TostudythemitochondrialDNAD-loopregioninstabilityinacuteleukemiaandlymphoma.Methods:TheHV-1regionandHV-2regionofD-loopregionof30acuteleukemiaandlymphomapatientswereanalyzedbyPCR-SSCP,thenamplificated,sequencedandcomparedwithrevisedCambridgereferencesequence(rCRS),mtDBandoralepi