第12章抗生素类药物的分析2.ppt

三、 检查 有关物质 （一） HPLC法（2005版） 盐酸四环素 第96页/共98页 （二）吸收度 杂质吸收度 第97页/共98页 四、 含量测定 ChP、USP HPLC法（外标法） 第98页/共98页 樱红色 对二甲氨基苯甲醛 H+ 第64页/共98页 麦芽酚反应 （三） （链霉素特有反应） H+ 分子重排 第65页/共98页 紫红 麦芽酚 第66页/共98页 链霉胍特有反应 8-羟基喹啉 坂口反应 （四） α -萘酚 链霉素加氢氧化钠水解生成链霉胍，链霉胍和8-羟基喹啉（或α－萘酚）分别与次溴酸钠反应，各自产物相互作用生成橙红色化合物 第67页/共98页 H+ IR法 （七） 庆大霉素无UV吸收 TLC、HPLC法 （八） (五)硫酸盐反应 (六)UV 第68页/共98页 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 链霉素分子中的N-甲基-L-葡萄糖胺的C4位上羟基连接1个D-甘露糖 方法 TLC中的对照品法 （BP） 1. 来源 反应中间体 三、特殊杂质检查及组分分析 第69页/共98页 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 导致各组分的多少影响产品的效价 和临床疗效 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 规定控制各组分的相对百分含量 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） 第70页/共98页 λmax = 330nm 庆大霉素无UV吸收, 当采用紫外检测器时，需进行衍生化处理。USP(29) 1.衍生化原理 硼酸盐缓冲液 第71页/共98页 Ch.P（2005）采用蒸发光散射检测器 BP（2005）采用电化学检测器 第72页/共98页 四、 含量测定 链霉素、庆大霉素 抗生素微生物检定法 第73页/共98页 8 9 2 C H 3 N R R 3 H O H C O N H 2 O O H O H O O H R 2 R 1 1 2 3 4 5 6 7 10 11 12 A B C D 第四节 四环素类抗生素(4个环) 第74页/共98页 四环素（TC）tetracycline 第75页/共98页 金霉素 (CTC) chlortetracycline 氯四环素 第76页/共98页 土霉素 (OTC) oxytetracycline 氧四环素 第77页/共98页 多西环素 (DOTC) doxycycline 脱氧土霉素 第78页/共98页 美他环素（METC） metacycline 第79页/共98页 第80页/共98页 一、 结构与性质 两性 （一） 酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性 二甲胺基 弱碱性 1. 与酸，碱均能成盐，一般情况下以盐酸盐形式存在 2. 强酸，强碱中溶解度增大 第81页/共98页 （二）旋光性：具有不对称C 原子 （三）紫外吸收和荧光性质 共轭双键，在UV区有吸收； 在紫外光的照射下产生荧光，降解产物亦有荧光 四环素经碱降解后产生黄色荧光 金霉素经碱降解后产生蓝色荧光 土霉素经酸降解后产生绿色荧光；经碱降解后产生绿色荧光，加热，荧光转为蓝色 第82页/共98页 （四）与金属离子络合，生成有色配位化合物 具有酚羟基，烯醇基能与金属离子成不溶性盐类或配位化合物 Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ 第83页/共98页 稳定性 （五） 1. 差向异构化 淡黄→黑 蓝色荧光 第84页/共98页 差向四环素 第85页/共98页 （土霉素、多西环素不易差向异构化） 第86页/共98页 2. 降解反应 （1）酸性下降解 第87页/共98页 脱水四环素 11 12 11a 6 5 5a 第88页/共98页 λmax = 445nm λmax = 435nm 橙黄色 第89页/共98页 ～ ～ TC ETC ATC EATC ＜ ＜ 脱水四环素 第90页/共98页 （2）碱性下降解 （荧光） 第91页/共98页 二、 鉴别试验 H2SO4反应 （一） 第92页/共98页 FeCl3反应 （二） 第93页/共98页 Cl-反应 （三） 1mol/L盐酸-甲醇（1→100） 0.01mg/ml UV法 （四） 第94页/共98页 TLC法 （五） 正相分配薄层色谱 EDTA 克服痕量金属离子造成的 拖尾现象 （六）HPLC 第95页/共98页 150℃ （缩合） 第32页/共98页 （缩合） 第33页/共98页 (2).与H2SO4 - HNO3反应 头孢菌素类 第34页/共98页 (