红细胞检验方法.pptVIP

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第一节 有关铁指标的检验 一、血清铁测定 【实验原理】血清(浆)铁测定的原理是:血淸铁以 Fe3+形式与转铁蛋白(transferrin, Tf)结合存在,降低介质的pH及加人还原剂 (如抗坏血酸、羟胺盐酸盐等)使Fe3+还原为Fe2+则转铁蛋白对铁离子的亲和力降低而解离,解离出的Fe2+与显色剂(如菲咯嗪和2,2-联吡啶等)反应生成有色络合物,同时作标准对照,计算出血清铁的含量。 【参考范围】成年男性ll.6?31.3μmol/L,女性9.0?30.4μmol/L;均值为 20μmol/L, 1岁后小儿时期约12μmol/L。 【应用评价】 1.降低常见于生理性铁需要量增加、缺铁性贫血(IDA)、慢性失血和感染等。 2.增高常见于肝疾病、铁粒幼细胞贫血、再生障碍性贫血、慢性溶血、巨幼细胞贫血和反复输血等。 3.血淸铁经常在变化,单项检测意义不大。 二、血清铁蛋白测定 【实验原理】血清铁蛋白测定(measurement of serum ferritin) —般采用固相放射免疫法。先用兔抗人铁蛋白与人血淸铁蛋白相结合,再用125I标记抗人铁蛋白与固相上结合的铁蛋白相结合,洗脱未结合的过多的放免标记物,洗脱结合放免标记的铁蛋白,用计数器与标准曲线比较,计算出铁蛋白值。 【参考范围】成年男性15?200μg/L,成年女性2?150μg/L,小儿低于成人; 青春期至中年,男性高于女性。 【应用评价】血清铁蛋白(SF)含量也能准确反映体内储铁情况,与骨髄铁染 色结果有良好的相关性。SF的减少是诊断缺铁性贫血敏感方法之一。 1.降低常见于缺铁性贫血、失血、慢性贫血等。 2.增高常见肝疾病、血色病、急性感染、铁代谢障碍性贫血及恶性肿瘤等。 三、血清总铁结合力测定 【实验原理】血淸总铁结合力(total iron binding capacity, TIBC)是指血淸中转铁蛋白能与铁结合的总量。通常情况下,仅有1/3的转铁蛋白与铁结合。在血淸中 加入已知过量的铁标准液,使血清中全部的Tf与铁结合达到饱和状态,再用吸附剂 (轻质碳酸镁)除去多余的铁。再按上述血淸铁测定方法,测得的血清铁含童,即为 总铁结合力,如再减去先测的血清铁,则为未饱和铁结合力(UIBC)。 【参考范围】TIBC:男性50?77μmol/L,女性54?77μmol/L; UIBC: 25.1 ?51.9;imol/L0 【应用评价】 1.增髙常见于缺铁性贫血和红细胞增多症等。 2.降低或正常见于肝疾病、恶性肿瘤、溶血性贫血、慢性感染和肾病综合征等。 四、血清转铁蛋白测定 【实验原理】血淸转铁蛋白测定(measurement of serum transferrin)的测定方法有免疫散射比浊法、放射免疫法和电泳免疫扩散法。免疫散射比浊法:利用抗人转铁蛋白血淸与待检测的转铁蛋白结合形成抗原抗体复合物,其光吸收和散射浊度增加,与标准曲线比较,可计算出转铁蛋白含量。 【参考范围】免疫散射比浊法为28.6?51.9μmol/L。 【应用评价】 1.增髙常见于缺铁性贫血和妊娠。 2.降低常见于肾病综合征、肝病综合征、肝硬化、恶性肿瘤、炎症等。 六、血清转铁蛋白受体测定 【实验原理】血清转铁蛋白受体测定(measurement of serum transferrin recep-tor) 一般采用酶联免疫双抗体夹心法。包被于固相上的血淸转铁蛋白受体(serum transferring receptor, s-TfR)特异的多克隆抗体,与待测血淸中转铁蛋白受体结合, 形成抗原抗体复合物,再加入酶标记的对转铁蛋白受体具有特异性的多克隆抗体,使之与抗原抗体复合物进行特异性结合,洗去未与酸标记的多克隆抗体结合部分,加人底物和显色剂,其颜色的深浅与转铁蛋白受体的量成正比。 【参考范围】以不同浓度标准品的吸光度值绘制标准曲线,通过标准曲线查出未 知标本的转铁蛋白受体水平。各实验室应根据试剂说明书上的参考范围进行判断。 【应用评价】 1.升髙常见缺铁性贫血和溶血性贫血。 2.降低可见于再障、慢性病贫血、肾衰竭等。 3.用于临床观察骨髄增生状况和治疗反应。如肿瘤化疗后骨髄受抑制和恢复情 况,骨髓移植后的骨髓重建情况,以及用EPO治疗各类贫血过程中的疗效观察和剂量调整等。 血淸铁、总铁结合力、铁蛋白测定及骨髄铁染色是小细胞低色素性贫血的实验鉴别诊断的重要手段 第二节 叶酸和维生素B12的检验 一、血清和红细胞叶酸测定 【实验原理】叶酸测定(measurement of folacin)常用放射免疫法(RIA),核 素与叶酸结合,产生放射碘叶酸化合物,其放射活性与血清或红细胞的叶酸含量 成比例,检测其放射活性,与已知标准对照,计算叶酸量。 【参考范围】血淸叶酸:成年男性8. 61?23.

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