DNA的复制1-1课件.pptVIP

主要内容 一、DNA复制的基本过程和共同特征 二、原核生物的DNA复制 三、真核生物的DNA复制 四、某些病毒基因组的复制 一.DNA复制的一般特征 一、DNA复制是酶促的化学反应 （一）底物：dNTP, N=A,T,C,G （二）模板：DNA单链 （三）引物： RNA或延长中的DNA子链，提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 （四）酶和蛋白质因子： DNA复制的酶系 1. 使DNA链解离的酶 2. DNA聚合酶 1、半保留复制(semiconservative replication) DNA的复制是将两条亲本链分开,每一条作为合成新链的模板,按碱基配对的规则合成新链,子代DNA的双链中一条是原来的链,另一条是新合成的链,所以称之为半保留复制。 2.基因组DNA都有固定的复制的起始点 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动 3. 复制子是基本的复制单位 DNA复制是从一个复制起点开始，直到完成DNA分子的复制或者一段DNA的复制后停止 一个复制起点开始复制的DNA分子或者DNA片段我们称复制子。 4. 双向复制形成复制泡和复制叉 DNA的单向复制和双向复制 复制起始点、复制子与复制叉（动画演示） 5、半不连续复制(semi-discontinuous replication) 顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为前导链（leading strand）。 另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随后链（lagging strand）。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 6、需要RNA引物(primer) DNA聚合酶不能直接聚合游离的dNTP，必须由一段核酸片段提供3’OH末端。 术语简介 基因和蛋白质的命名缩写： 1）基因通常用3个能反映其基本功能的斜体小写字母表示。如：dna 基因影响DNA的 复制，rec 基因影响DNA的重组。 当几个基因影响同一过程时，通常按发 现的先后顺序加上A、B、C等。 2）对基因的蛋白质产物命名，不用斜 体，且第1个字母大写。如：dnaA和recA基因的产物叫做DnaA和RecA 。 真核生物的DNA聚合酶 已至少发现5种：DNA-pol α,β,γ,δ,ε DNA-pol α：起始引发，有引物酶活性 DNA-pol β：参与低保真度的复制 DNA-pol δ：主要的催化酶，合成先导链 DNA-pol ε：校读、修复和填补缺口作用 DNA-pol γ：在线粒体DNA复制中起催化作用 引物合成 引发体引导引物酶到达适当的位置合成引物。 DNA连接酶(DNA ligase) DNA复制为什么要合成一个RNA引物，而后又把这个引物消除呢？这是保证DNA聚合过程高度精确的又一措施。已知DNA 聚合酶具有3??5?外切酶功能校对复制过程中的核苷酸，也就是说聚合酶在开始形成一个新的磷酸二酯键前，总是检查前一个碱基是否正确，这就决定了它不能从头开始合成。因此先合成一条低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成，并以核糖核苷酸来表示是“暂时”的，当DNA开始聚合以后再以5??3?外切酶的功能切除，以高忠实性的脱氧核苷酸取而代之，确保复制的忠实性。 * 四、DNA复制的保真性 DNA聚合酶对碱基配对的选择作用 对正确碱基配对和错误的碱基配对的亲合力不同 DNA聚合酶对模板的识别作用 识别正确的模板及3’端引物，然后识别dNTP DNA聚合酶3’-5’外切活性的校正作用 5′ A G C T T C A G G A T A ? 3′ | | | | | | | | | | | 3′ T C G A A G T C C T A G C G A C 5′ 解链相关酶类 1. 解旋酶(helicase) 2. 拓扑异构酶（topoisomerase I、II） 3. 单链DNA结合蛋白(SSB) 解旋酶 (helicase) 解螺旋酶 作用：断裂互补碱基间的氢键，使DNA成单链 dnaA、B、C… DnaA、B、C… ATP DNA解链酶(DNA helicase)： 每解开一对碱基，需消耗两分子ATP。 拓扑异构酶（Topo） DNA正超螺旋与负超螺旋 负超螺旋 正超螺