hif1α基因沉默对人肺腺癌a549细胞裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响-effects of hi f1 α gene silencing on the growth and survivin expression of human lung adenocarcinoma a549 cell transplanted tumor in nude mice.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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hif1α基因沉默对人肺腺癌a549细胞裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响-effects of hi f1 α gene silencing on the growth and survivin expression of human lung adenocarcinoma a549 cell transplanted tumor in nude mice.docx

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hif1α基因沉默对人肺腺癌a549细胞裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响-effects of hi f1 α gene silencing on the growth and survivin expression of human lung adenocarcinoma a549 cell transplanted tumor in nude mice

(20.13±3.15)%和0.53±0.09，均明显低于对照组[（66.55±3.55）%和1.64±0.19]和无意义序列转染组[（69.05±5.32）%和1.76±0.09](P均0.05)；4.HIF-1αMiRNA组移植瘤组织中survivin蛋白的相对表达量分别为(22.18±3.12)%和0.50±0.06，均明显低于对照组[（69.05±5.32）%和1.07±0.08]和无意义序列转染组[（68.53±4.10）%和1.02±0.09](P均0.05)；5.HIF-1αMiRNA组移植瘤组织中凋亡细胞的数量(22.52±2.81)%显著高于对照组(11.10±0.55)%和无意义序列转染组(12.27±0.65)%,（P均0.01）.结论：1.HIF-1αMiRNA可显著抑制肺腺癌裸鼠移植瘤生长，增加肿瘤细胞凋亡；2.HIF-1αMiRNA导致HIF-1αmRNA和蛋白表达减少的同时survivinmRNA和蛋白表达也减少，提示HIF-1αMiRNA干扰通过下调survivin的表达增加肿瘤细胞凋亡，发挥抑制肿瘤生长的作用；关键词：HIF-1α；survivin；A549；裸鼠；MiRNAEffectofHIF-1αgenesilencingonthegrowthofhumanlungadenocarcinomacellA549innudemiceandsurvivinexpressionPost-graduate：SHENYuanbingTutor：CHENyuqingAbstract0bjective:ToobservetheeffectofHIF-1αgenesilencingonthegrowthofhumanlungadenocarcinomacellA549innudemiceandsurvivinexpression,inordertofurthertostudytheregulationroleofsurvivinMethods:Humanlungcancercell1ineA549cellsweredividedinto3groups:controlgroup,controlgrouptransfectedwithscrambledsequenceplasmidandHIF-1α-MiRNAgrouptransfectedwithHIF-1α-MiRNAeukaryoticexpressionplasmid.Culturedcellsofthethreegroupswereinoculatedinnudemicetoestablishlungcancer-bearingnudemiceeightineverygroup,Tumor’sdimensionsofthreegroupsweremeasuredPerthreedaysandtumorgrowthcurveweremaked.After58days,nudemicewerekilledandtumorswereweighed,theanti-tumoreffectwasreckoned,HIF-1αMiRNAassaywasperformedtoevaluatethetumor-suppressiveeffectofHIF-1αsilencingonlungcancer-bearingnudemice.RT-PCRwasadoptedtodetectthemRNAexpressionofHIF-αandsurvivin.ImmunohistochemistryandWesternblotassaywasdonetodetecttheproteinexpressionofHIF-1αandSurvivin.TUNELstaininwasusedtodetectapoptosisintumortissue.Results:Tumorformationrateinnudemiceis100%.SubcutaneousNodulescouldbetouchedafterinoculation4-5daysincontrolgroup,controlgrouptransfectedwithscrambledsequenceplasmidand6-7daysinHIF-1α-MiRNAgroup,thestandard(about50mm3)wasachievedafter10days,ThetumorgrowthinHIF-1α-MiRNAgroupwassignificantlyslowerthanthatincontrolgroupsandcontrolgrouptransfectedwithscrambledsequenceplasmi