hif1α和vegfc在人炎症牙髓组织中表达的研究-expression of hi f1 α and vegfc in human inflammatory pulp tissue.docxVIP

中文摘要背景及目的：牙髓炎是由细菌作为始动因子引起牙髓组织的慢性感染性疾病。乏氧诱导因子-1（hypoxiainduciblefactor-1,HIF-1）作为细胞在乏氧情况下由激活基因编码的转录因子。血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）是一种高度特异性的细胞因子，具有促进血管内皮细胞分裂、诱发血管形成及增加血管通透性的功能。在乏氧状态下，HIF-1能够诱导而转录激活VEGF，其作为HIF-1α的主要靶基因之一。目前研究发现，HIF-1α和VEGF在肿瘤血管生成之间存在着密切关系。至今为止，HIF-1α和VEGF-c在牙髓炎中的作用研究甚少。本课题主要研究目的是观察炎性牙髓组织中HIF-1α和VEGF-c表达与分布情况，分析牙髓组织在不同状态下的缺氧情况及其程度。探讨HIF-1α和VEGF-c调控牙髓组织炎症进程中的作用，研究结果将为阐明牙髓炎的氧代谢机制以及牙髓炎的靶向治疗提供理论依据。方法：临床随机收集年龄在20~50岁之间患者的牙髓组织，其中男性18名，女性22名，平均年龄32.9±11.4岁。经统计学处理分析各组之间在年龄、性别上差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。根据牙髓组织病理学分类进行如下四类分组：正常牙髓组、深龋牙髓组、慢性牙髓炎组以及急性牙髓炎组共40例。所有牙髓标本来自因正畸需要拔除或无法保留的第三磨牙。牙髓组织标本于2％戊二醛溶液中固定48h以上，制成颊舌向5μm厚度连续切片。通过HE染色方法，观察各组牙髓标本的组织学改变并评分；应用免疫组织化学染色法，观察HIF-1α和VEGF-c在人牙髓组织中的表达及分布、并计算阳性细胞密度。应用SPSS16.0统计学软件对所有数据进行分析处理：1）用Kruskal-WallisH秩和检验比较不同组间牙髓组织炎症程度评分；2）用Kruskal-WallisH秩和检验比较各组间牙髓HIF-1α和VEGF-c阳性细胞密度；3）用Pearson相关分析，评估各I组间牙髓炎症程度评分与HIF-1α、VEGF-c阳性细胞密度之间的相关性；4）通过Pearson相关分析，评估不同组间HIF-1α和VEGF-c表达水平之间的相关性。结果：1.牙髓组织学观察结果1）正常牙髓组与深龋牙髓组中，无明显炎性细胞浸润和炎性渗出物。2）与正常牙髓组相比，慢性牙髓炎组的牙髓组织出现中等程度的炎症细胞浸润。3）与慢性牙髓炎组相比，急性牙髓炎组表现为更明显的炎性细胞浸润。4）与正常牙髓组与深龋牙髓组相比，炎症牙髓组织的炎症程度评分显著升高（P0.01）。其中，急性牙髓炎组的炎症程度评分明显高于慢性牙髓炎（P0.01）。2.牙髓组织中HIF-1α与VEGF-c免疫组化染色结果HIF-1α表达主要定位于成牙本质细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞及部分炎症细胞。正常牙髓组与深龋牙髓组中，牙髓组织几乎没有HIF-1α阳性表达出现。与正常牙髓组与深龋牙髓组相比较，慢性牙髓炎组中HIF-1α阳性细胞密度显著升高（P0.01）；且急性牙髓炎组HIF-1α阳性细胞密度显著高于慢性牙髓炎组（P0.01）。VEGF-c表达主要定位于成牙本质细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞，巨噬细胞和浆细胞。正常牙髓组与深龋牙髓组中，牙髓组织见少量VEGF-c阳性表达出现。与正常牙髓组与深龋牙髓组相比较，急性牙髓炎组中VEGF-c阳性细胞密度显著升高（P0.01）；且慢性牙髓炎组VEGF-c阳性细胞密度显著高于急性牙髓炎组（P0.01）。3.HIF-1α和VEGF-c阳性细胞密度与牙龈组织炎症程度评分的相关性分析1）通过Pearson相关分析，不同组牙髓组织中HIF-1α阳性细胞密度与炎症程度评分存在正的直线相关关系（P0.01）。2）通过Pearson相关分析，不同组牙髓组织中VEGF-c阳性细胞密度与炎症程度评分存在正的直线相关关系（P0.01）。4.HIF-1α和VEGF-c表达水平的相关性分析II经Pearson相关分析，炎症牙髓组织中HIF-1α阳性细胞密度与VEGF-c阳性细胞密度密切相关，且存在正的直线相关关系（P0.01）。结论：1.与正常牙髓组、深龋牙髓组比较，炎症的牙髓组织HIF-1α和VEGF-c的表达明显升高。2.HIF-1α和VEGF-c的表达量与牙髓炎症程度存在明显的相关性。结果提示HIF-1α和VEGF-c可能参与牙髓炎的炎症反应，其具体的作用机制仍需要进一步的研究。关键词：牙髓炎；氧代谢；乏氧诱导因子-1α；血管内皮生长因子-cIIIABSTRACTBackgroundandobjectivePulpitisistheinflammationofdentalpulptissue,whichismainlycausedbybacteriainfec