hif1和ho1在h9c2心肌细胞缺氧复氧损伤时的相互关系-the relationship between hi f1 and ho1 in h9c2 myocardial cell hypoxia-reoxygenation injury.docxVIP

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hif1和ho1在h9c2心肌细胞缺氧复氧损伤时的相互关系-the relationship between hi f1 and ho1 in h9c2 myocardial cell hypoxia-reoxygenation injury

摘要目的:探讨在H9C2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤时缺氧诱导因子(hypoxiainduciblefactor-1,HIF-1)与血红素加氧酶(hemeoxygenase-1,HO-1)的相互关系以及它们对心肌细胞的作用。方法:(1)对H9C2心肌细胞进行缺氧/复氧(10h/6h)处理;(2)H9C2心肌细胞随机分为以下处理组:正常组(Normal);缺氧/复氧组(H/R);HIF-1抑制剂YC-1预处理的缺氧/复氧组(YC-1+H/R);HIF-1诱导剂DMOG预处理的缺氧/复氧组(DMOG+H/R);HO-1抑制剂ZnPPIX预处理的缺氧/复氧组(ZnPP+H/R);HO-1诱导剂Hemin预处理的缺氧/复氧组(Hemin+H/R)(3)采用Westernblot和RT-PCR分别检测各组HIF-1和HO-1蛋白及mRNA表达水平;AnnexinV-FITC检测心肌细胞凋亡;MTT检测心肌细胞存活;生化法检测LDH活性;TBA法检测MDA水平。结果:(1).与缺氧/复氧组相比,用Hemin预处理的缺氧/复氧组,其心肌细胞凋亡率降低(9.67±1.62%vs20.93±2.66%,p0.05),存活率升高(82.54±2.07%vs44.98±2.20%,p0.05),LDH活性降低(75.13±4.75IU/Lvs104.93±11.89IU/L,p0.05),MDA水平降低(2.41±0.26nmol/mlvs3.41±0.12nmol/ml,p0.05);用ZnPP预处理的缺氧/复氧组,其细胞凋亡率升高(38.91±2.57%vs20.93±2.66%,p0.05),存活率降低(35.43±1.13%vs44.98±2.20%,p0.05),LDH活性升高(135.97±5.14IU/Lvs104.93±11.89IU/L,p0.05),MDA水平升高(4.82±0.43nmol/mlvs3.41±0.12nmol/ml,p0.05);(2).与缺氧/复氧组相比,用DMOG预处理的缺氧/复氧组,其细胞凋亡率降低(11.93±1.72%vs20.93±2.66%,p0.05),存活率升高(78.13±1.69%vs44.98±2.20%,p0.05),LDH活性降低(77.53±2.66IU/Lvs104.93±11.89IIIU/L,p0.05),MDA水平降低(2.36±0.08nmol/mlvs3.41±0.12nmol/ml,p0.05);用YC-1预处理的缺氧/复氧组,其细胞凋亡率升高(44.01±3.76%vs20.93±2.66%,p0.05),存活率降低(30.61±2.00%vs44.98±2.20%,p0.05),LDH活性升高(151.33±4.19IU/Lvs104.93±11.89IU/L,p0.05),MDA水平升高(5.22±0.18nmol/mlvs3.41±0.12nmol/ml,p0.05);(3).与正常组相比,缺氧/复氧组HIF-1和HO-1表达明显升高(p0.05);(4).与缺氧/复氧组相比,用DMOG预处理的缺氧/复氧组,HIF-1和HO-1蛋白表达均显著升高(p0.05);用YC-1预处理的缺氧/复氧组,HIF-1和HO-1蛋白表达均显著降低(p0.05);用Hemin预处理的缺氧/复氧组,HO-1的蛋白及mRNA表达均显著升高(p0.05),但HIF-1蛋白及mRNA表达无变化(p>0.05);用ZnPP预处理的缺氧/复氧组HO-1蛋白及mRNA表达显著降低(p0.05),但HIF-1蛋白及mRNA表达亦无变化(p>0.05)。结论:(1).HO-1在H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤时具有抗凋亡、抗氧化应激作用;(2).HIF-1在H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤时也具有抗凋亡、抗氧化应激作用;(3).在H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤时,HIF-1可影响HO-1的表达,而HO-1对HIF-1的表达无影响;关键词:缺氧诱导因子-1;血红素加氧酶-1;缺氧/复氧损伤;H9C2心肌细胞;凋亡;氧化应激IIIABSTRACTObjective:Toinvestigatetherelationshipandroleofhypoxiainduciblefactor-1(HIF-1)andhemeoxygenase-1(HO-1)inhypoxia/reoxygenation(H/R)injuryofH9C2cardiom-yocytes.Methods:(1).TheH9C2cardiomyocyteswereculturedtosubconfluenceinvitroandsubjectedtohypoxia/reoxygenation

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