hif1与胃癌性促纤维反应的相关性研究-study on the correlation between hi f1 and gastric cancer-induced fibrogenic response.docxVIP

HIF-1与胃癌性促纤维反应的相关性研究中文摘要【研究背景】HIF-1(HypoxiaInducedFactors-1，缺氧诱导因子-1)是一种真核细胞转录因子，属于bHLH-PAS蛋白家族成员，由a、β亚基组成的异二聚体，几乎表达于所有多细胞生物。已证实HIF-1通过调控800多种下游靶基因的激活，参与多种恶性肿瘤的生长、侵袭、转移及提示预后等。目前，HIF-1a蛋白表达及其基因突变、短串联重复序列（GT）n多态性与胃癌性促纤维反应的相关性研究均尚未见报道。【研究目的】1、研究HIF-1a表达与胃癌生物学行为演进关系及其与癌性促纤维反应的相关性；2、探讨HIF-1A(HIF-1a基因)突变、短串联重复序列（GT）n多态性与胃癌性促纤维反应的相关性。【研究方法】筛选2007年--2012年胃癌病例690例。在显微镜下观察，按癌性促纤维反应标准，分成四组不同生长模式的胃癌，依次为胃硬癌生长模式的胃癌（Case156例）、中间型偏硬癌生长模式的胃癌（ControlI182例）、中间型偏髓样生长模式的胃癌（ControlII188例）、罕见促纤维反应的髓样生长模式的胃癌（ControlIII164例）。免疫组化染色检测HIF-1a表达情况，分析HIF-1a表达与胃癌临床病理特征的关系，特别是HIF-1a与胃癌的癌性促纤维反应的相关性。通过LDR-PCR检测690例胃癌肿瘤组织和200例不同生长模式胃癌的正常胃黏膜组织的HIF-1A突变位点及短串联重复序列（GT）n基因型及等位基因频率，并行基因测序方法验证。【结果】1、HIF-1a表达于胃肿瘤细胞的胞核与胞浆，胃硬癌及中间型偏硬癌生长模式的胃癌细胞HIF-1a表达以细胞核阳性着色为主；中间型偏髓样生长模式胃癌、髓样生长模式胃癌细胞HIF-1a表达以胞浆强阳性为主，个别肿瘤细胞核阳性。胃癌HIF-1a表达总体阳性率45.95%，不同发病年龄、肿瘤发生部位、组织学类型、Lauren分型、淋巴结转移及TNM分期的HIF-1a阳性率存在统计学差异。年龄组≤50岁HIF-1a表达阳性率高于其它年龄组；胃窦部HIF-1a表达阳性率高于近端胃；低分化、胃型胃癌HIF-1a表达阳性率显著高于高-中分化胃癌、肠型及混合型胃癌；伴淋巴结转移灶的胃癌，HIF-1a表达阳性率显著高于不伴淋巴结转移的胃癌；肿瘤TNM分期越高，HIF-1a表达阳性率越高。2、四组不同生长模式胃癌在发病年龄、肿瘤发生部位、组织学分型、Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均存在显著的统计学差异。癌性促纤维反应显著的胃硬癌组平均发病年龄小于其他三组；胃硬癌多发生于远端胃，髓样生长胃癌好发于近端胃。癌性间质显著的硬癌多为低分化、弥漫性生长（胃型），淋巴结转移率及高TNM分期所占比例高于其他三组。3、四组不同生长模式胃癌HIF-1a表达阳性率存在显著统计学差异，胃硬癌HIF-1a表达阳性率高于其他三组。HIF-1a阳性率越高，癌性促纤维反应程度越强。4、筛选HIF-1A单核苷酸突变位点C1772T、G1790A、C111A、G552C，在胃癌中，这些位点均为野生型纯合子。四组不同生长模式胃癌肿瘤组织与癌旁相对正常胃粘膜位点A19773G、A14308C的等位基因及基因型频率无差别，这两个位点碱基变化在胃癌组织中未见突变。5、胃癌HIF-1Aintron13的（GT）n等位基因14、15频率高于其他等位基因频率。6、胃硬癌与髓样生长模式胃癌存在（GT）n基因型频率差异，胃硬癌（GT）n基因型频率14/15高于髓样生长胃癌，基因型16/17仅出现于胃硬癌；髓样生长胃癌（GT）n基因型频率14/14、15/15高于硬癌。胃硬癌HIF-1A（GT）n杂合子基因型频率高于髓样生长模式胃癌；髓样生长模式胃癌（GT）n纯合子基因型频率高于胃硬癌基因型频率。【结论】1、癌性促纤维反应程度与HIF-1a表达相关，肿瘤细胞HIF-1a阳性表达率越高，癌性促纤维反应程度越强。2、HIF-1a表达参与胃癌生物学行为的演进。3、尚未检测出四种不同生长模式胃癌间存在HIF-A突变。4、胃癌HIF-1Aintron13的（GT）n等位基因14、15频率高于其他等位基因频率。胃硬癌生长模式HIF-1Aintron13短串联重复（GT）n杂合子基因型频率高于髓样生长模式胃癌；髓样生长模式胃癌（GT）n纯合子基因型频率高于胃硬癌基因型频率。提示HIF-1A（GT）n基因型差异在癌性促纤维反应中可能存在相关性。【关键词】HIF-1，胃癌，免疫组织化学，突变，短串联重复序列（GT）n多态性AresearchaboutthecorrelationofHIF-1andgastriccarcinoma-relateddesmoplasticresponseAbstra