(病原生物和 与免疫学实验)免疫实验二：沉淀反应和 与溶血试验-陈玮琳、翁莉霞.ppt

医学免疫学实验 实验二 （一）沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验（示教） 2、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验 （二）补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验（原理） 一定条件 Ag、Ab比例合适 （一） 沉淀反应 可溶性Ag + Ab 沉淀物 沉淀反应可在溶液中进行，也可在琼脂等凝胶中进行 1、单向琼脂扩散试验 （定量） 2、双向琼脂扩散试验 （定性或半定量） Ag Ab Ab ？ Ag Ab ？ Ag Ab ？ Ag ：标本中无Ag ：标本中有Ag （相同抗原?） （在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线） 标本 阳性对照 Ab Ag Ag ? ? ? ? Ab ？ Ag 1. Make a agar plate (without Ab or Ag) 2. Punch wells Add samples: Anti-AFP positive control (AFP) Test sample (AFP?) Ab Ag ？ Ab ？ Ag Ab ？ Ag ：no Ag(AFP) in sample serum ：same Ag(AFP) in sample serum Result (1): 4. incubation and observe results ：no Ag(AFP) in sample serum ：same Ag(AFP) in sample serum Ab Ag Ag Ag Ag ? ? ? ? Ab Result (2): sample serum (AFP?) AFP, (positive control) Anti-AFP Ab Ag Ag ? ? ? ? sample serum (AFP?) Anti-AFP Result (3): Ab ？ Ag AFP, (positive control) 明天下午看结果， 3、对流免疫电泳 原理图： Ab Ag ＋ － pH 8.6 电泳力： 电渗力： 合力： 运动方向： 14 对流免疫电泳检测方法： Ab 阳性对照（Ag） 待测标本（？Ag） （有沉淀线：有Ag； 无沉淀线：无Ag） ？ ＋ － 对流免疫电泳检测方法（加样图）： Ab（抗AFP） 阳性对照（Ag） （阳性血清，含AFP） 待测标本（？Ag，？AFP） （有沉淀线：有Ag，AFP； 无沉淀线：无Ag，无AFP） ？ ＋ － （二）补体参与的免疫反应 1、溶血反应 补体 SRBC + Ab SRBC-Ab 溶血 （溶血素） 请按照实验指导讲义方法进行操作 2人/组 注意观察溶血现象 请分析：为何第3、4管不溶血，分别缺什么成分？ 2、补体结合试验（检测原理） ？ 补体 Ab ？ Ab 补体 反应系统（待测系统） 指示系统 溶血素 溶血素 SRBC SRBC 有Ag 无Ag 不溶血 溶血 （标本中有 Ag） （标本中无 Ag）