il35通过增强髓源性细胞聚积和肿瘤血管生成促进肿瘤生长-il35 promotes tumor growth by enhancing myelogenous cell accumulation and tumor angiogenesis.docx

缩略词表（Abbreviation）ILInterleukin白介素TregRegulatoryTcell调节性T细胞IHCimmunohistochemistry免疫组织化学MDSCmyeloid-derivedsuppressorcells髓源性抑制细胞CTLcytotoxicTlympoeytes细胞毒性T淋巴细胞EBI3EBV-inducedgene3EB病毒诱导基因3PFAparaformaldehyde多聚甲醛VEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯ERK1/2extracellularregulatedkinase1/2细胞外信号调节激酶1/2HPRTHypoxanthineguaninePhosphoribosylTransferaseGAPDHGlyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶EGTAethyleneglycoltetraaceticacid乙二醇二乙醚二胺四乙酸FBSFetalbovineserum胎牛血清TGThapsigargin毒胡萝卜素ATPadenosine-triphosphate三磷酸腺苷(腺苷三磷酸)ECLEnhancedChemicalluminescence增强化学发光法PMSFPhenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟化物ICOS，inducibleco-stimulator诱导性共刺激分子RT-PCRreversetranscriptase-polymerasechainreaction逆转录聚合酶链反应DTTDiethiothreitol二硫苏糖醇DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜bpbasepair(s)碱基对Kbkilobasepair(s)千碱基对OMEMoptimizeminimunessentialmedium优化的最低必需培养基SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基硫酸钠dNTPdeoxy-ribonucleosidetriphosphate三磷酸脱氧核糖核苷EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸IPTGIsopropyl-β-d-thiogalactopyranoside异丙基-β-d-硫代半乳糖苷HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化物酶IL-35通过增强髓源性细胞聚积和肿瘤血管生成促进肿瘤生长博士研究生：王志会指导教师：冯友梅白雪峰教授中文摘要白介素35（IL-35）是白介素12（IL-12）家族的新成员，由p35亚基和EBI3亚基组成，受体是IL-12Rβ2和gp130。现已证明IL-35可以通过其受体发挥抗炎作用，其在多种自身免疫性疾病中的作用已有比较深入的研究，但在肿瘤方面目前为止还未见有文献报道。虽然有研究表明IL-35由调节T细胞（Treg）产生，但基因表达分析显示IL-35有着更广泛的表达分布，包括在多种肿瘤组织内的表达。首先，我们利用人体肿瘤组织进行免疫组化染色，发现在人巨型B细胞淋巴瘤、鼻咽癌、皮肤黑色素瘤和淋巴结转移性黑色素瘤中均发现有IL-35的表达。我们通过转染法将IL-35导入浆细胞瘤J558和黑色素瘤B16细胞中，并经过药物筛选得到稳转细胞株，以此研究肿瘤源性的IL-35在肿瘤免疫和肿瘤发生方面的作用。结果我们发现IL-35对肿瘤细胞在体外的生长不产生影响，但在野生型和免疫缺陷型小鼠体内对肿瘤生长有明显的促进作用。肿瘤源性的IL-35增加了CD11b+Gr1+髓源性细胞在肿瘤微环境内的聚集，并且促进肿瘤血管的生长。在正常小鼠体内，肿瘤特异性的CTL免疫应答被减弱了。IL-35不能直接抑制特异性CD8+T细胞的活性、分化以及功能。然而，经IL-35处理的肿瘤细胞上调了gp130的表达，同时降低了自身对CTL杀伤作用的敏感性。关键词：白介素35；髓源性抑制细胞；浆细胞瘤；黑色素瘤Tumor-derivedIL-35promotestumorgrowthbyenhancingmyeloidcellaccumulationandangiogenesisAbstractIL-35isamemberoftheIL-12familyofcytokinesconsistingofIL-12p35subunitandIL-12p40-relatedproteinsubunit,EBV-inducedgene3(EBI3).IL-35functionsthroughIL-35R(IL-12Rβ2andgp130)andhasapotentim