il33在结直肠癌中的表达及其临床意义-expression of il33 in colorectal cancer and its clinical significance.docx

学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中 除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰 写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中以明 确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅 和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文；学校可以向国家有关 部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部 分内容。对于保密的论文，按照保密的有关规定和程序处理。作者签名：导师签名： 日期：年月日日期：年月日学位论文知识产权声明本人郑重声明：我所提交答辩的学位论文，是本人在导师指导下完成的 成果，该成果属于汕头大学医学院，受国家知识产权法保护。本人在毕业离 校前会将有关的研究资料和结果全部上交导师，离校后使用与学位论文相关 的数据资料参加学术会议、公开报告、发表论文和申请基金等，须征得导师 及导师所在单位的同意。不得擅自对外披露本论文尚未公开的研究成果。本 人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。注：保密的学位论文在解密后适用本声明。 研究生签名：日期：年月日 导师签名：日期：年月日摘要目的：本研究旨在检测 IL-33 在结直肠癌组织中的表达，并探究 IL-33 在结直肠癌的发病机 制中所发挥的作用，初步探索 IL-33 与结直肠癌的发病、进展、转移之间的关系，为探究 结直肠癌新的诊断指标、治疗靶点提供新的研究方向。方法：以免疫组化的方法检测50例结直肠腺瘤组织、50例结直肠癌患者肿瘤组织及癌周组织（大于癌周5cm）中IL-33的表达，比较三组阳性表达率，并检验IL-33的表达与结直肠病理 特征的相关性。于汕头大学医学院第二附属医院病理科收集2006年5月至2012年5月的以上 组织蜡块，其中，结直肠癌患者男性32例，女性18例，患者年龄分布为33——72岁，中位 年龄48岁， 临床分期Ⅰ——Ⅱ期23例，Ⅲ——Ⅳ期27例，全部病例在术前均未行放、化 疗，术后病理诊断由汕头大学医学院第二附属医院病理科完成。兔来源IL-33单克隆抗体于 ABcam公司购买（USA），二抗试剂盒——ElivisionTM plus Polyer HRP (鼠/ 兔) Kit-9902于 苏州碧云天生物技术公司购买（Beyotime Institute ofBiotechnology），DAB显色试剂盒 购于北京中杉金桥生物技术有限公司（Zhongshan Golden BridgeBiotechnology CO.LTD）， SABC浓缩液购于北京索莱宝科技有限公司（Beijing Solarbio Science Technology Co.Ltd）. 参照说明书按SABC法进行检测，镜下观察DAB显色，每一批检测均设置PBS液代替一抗 的阴性对照。200 倍镜下观察并用 OLYMPUS 图像采集系统拍照，每张切片至少观察 5 个随机视 野，观察 IL-33 的表达情况。使用 SPSS 19.0 软件进行统计数据分析。应用卡方检验分析 IL-33 的表达情况。总体生存率是指从手术日到癌症死亡的时间段，利用 Kaplan-Meier 法 绘制生存曲线。 以 P 0.05 为具有统计学意义。结果：1．IL-33 在癌旁组织、结直肠腺瘤和腺癌中的表达有显著性差异，其中在癌旁组织中表达 量最 低， 在结 直肠 腺瘤 中主 要分 布于 表面 上皮 ，与 癌旁 组织 相比 无显 著性 差异（ X2=0.488 ， P0.05 ）， 结 直 肠 腺 癌 组 织 中 IL-33 阳 性 表 达 率 显 著 高 于 癌 旁 黏 膜 组（X2=23.188，P0.01）和结直肠腺瘤组（X2=17.647，P0.01），且阳性信号富集于细胞浆 和表面上皮。2．IL-33 表达与结直肠癌患者的年龄、性别、分化程度无显著相关性，而与肿瘤浸润 肠壁深度、淋巴结转移和临床分期显著相关。3．IL-33 表达情况与患者的死亡率无相关性。结论：1. IL-33 在结直肠癌组织中过表达，且主要表达于肠上皮细胞的细胞质，在细胞核 亦有表达。2. IL-33 可能参与了结直肠癌的发生，并促进结直肠腺瘤向结直肠癌的转变。3. IL-33 与结直肠癌预后显著相关，可能促进结直肠癌的进展和转移。4. IL-33 可能作为结直肠癌早期诊断和预后的潜在标志物。关键词：IL-33；细胞因子；结直肠癌；肿瘤微环境；免疫组化ABSTRACTObjective:To detect the expression of IL-33