il审审6r抗体调节pmma骨水泥介导的滑膜成纤维细胞mmps和血管化因子mrna表达的实验研究-experimental study on il - 6r antibody regulating mmps and angiopoietin mrna expression in synovial fibroblasts mediated by pmma bone cement.docx

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2018-05-29 发布于上海
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il审审6r抗体调节pmma骨水泥介导的滑膜成纤维细胞mmps和血管化因子mrna表达的实验研究-experimental study on il - 6r antibody regulating mmps and angiopoietin mrna expression in synovial fibroblasts mediated by pmma bone cement.docx

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il审审6r抗体调节pmma骨水泥介导的滑膜成纤维细胞mmps和血管化因子mrna表达的实验研究-experimental study on il - 6r antibody regulating mmps and angiopoietin mrna expression in synovial fibroblasts mediated by pmma bone cement

3.1.3 加入 IL-6R 抗体、PMMA 骨水泥颗粒后的滑膜成纤维细胞形态学观察 123.2IL-6R 抗体、PMMA 对 RA 滑膜成纤维细胞增殖活力影响 133.3 总 RNA 提取及检测 143.4 滑膜成纤维细胞 MMP-1、MMP-3、VEGF 和 PDGF mRNA 的相对表达量 14第 4 章讨论............................................................................................................................. 16 4.1 成纤维细胞与假体无菌性松动 ..................................................................................... 164.2IL-6、IL-6R 抗体与假体无菌性松动 164.3MMPs、促血管化因子与假体无菌性骨溶解 17第 5 章结论............................................................................................................................. 20参考文献....................................................................................................................................... 21附录：主要试剂配制................................................................................................................... 24综述............................................................................................................................................. 26攻读硕士学位期间科研情况....................................................................................................... 40本人简历....................................................................................................................................... 41致谢............................................................................................................................................. 42中文摘要目的：探讨 IL-6R 抗体对 PMMA 骨水泥介导的滑膜成纤维细胞 MMP-1 和 MMP-3、VEGF和 PDGF mRNA 表达的调节。方法：从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养。倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察，免疫细胞化学（SABC 法）染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定。根据加入不同培养物，实验分为 3 组：PMMA 组：75μg/ml PMMA 骨水泥颗粒；IL-6R 抗体组：10 ng/mlIL-6R 抗体+75μg/ml PMMA 骨水泥颗粒；空白对照组。采用细胞计数试剂盒-（8Cell CountingKit-8, CCK-8）检测 IL-6R 抗体、PMMA 对滑膜成纤维细胞增殖活力影响；实时荧光定量PCR（real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR）检测 MMP-1、 MMP-3、VEGF 和 PDGF mRNA 表达。结果：原代滑膜细胞贴壁后，初期为短梭形。连续 3 次传代后，95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞。SABC 法染色检测结果显示：上述成纤维样细胞抗 CD68 抗体阴性，抗 vimentin 抗体呈棕黄色，为阳性反应。CCK-8 检测显示：与 PMMA 组和空白对照组相比， IL-6R 抗体组吸光度（A）