islet1促c3h10t12向心肌细胞分化过程中电生理特性研究-study on electrophysiological characteristics of islet 1 in promoting differentiation of c3h10 t12 into cardiomyocytes.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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islet1促c3h10t12向心肌细胞分化过程中电生理特性研究-study on electrophysiological characteristics of islet 1 in promoting differentiation of c3h10 t12 into cardiomyocytes

英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文全称Islet-1Insulin gene enhancer binding protein isl-1胰岛素基因增强子结合蛋白-1 DMEM/F12Dulbeccos modified Eagle medium/F12DMEM/F12 培养基EDTAEthylene diamine tetraacetic acid乙二胺四乙酸PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液ATPMgAdenosine 5，-triphosphate三磷酸腺苷镁盐cTnTCardiac troponin T心肌肌钙蛋白 TCX43Gap junction protein 43缝隙连接蛋白 43 ItoTransient outward potassium current瞬时外向钾电流IksSlow activation delayed rectifier K+current缓慢激活延迟整流钾电流Ik1Inward rectifier K+ current内向整流钾电流IL-CaL-type calcium currentL 型钙电流IT-CaT-type calcium currentT 型钙电流INaSodium current钠电流Scn5aSodium channel, voltage-gated, type V, alpha (Scn5a), mRNAKcnj2Potassium inwardly-rectifying channel, subfamily J, member 2 (Kcnj2), mRNAKcne1Potassium voltage-gated channel,subfamily Q, member 1 (Kcne1), mRNA Kcnd3Potassium voltage-gated channel,Shal-related family, member 3 (Kcnd3), mRNACacan1cCalcium channel, voltage-dependent, L type, alpha1C subunit(Cacna1C), mRNACacan1hCalcium channel, voltage-dependent, T type, alpha 1H subunit(Cacna1h), mRNA钠通道 Nav1.5 亚单位信使核糖核酸内向整流钾通道 kcnj2 亚基信使核糖核酸钾离子通道 kcne1 亚基信使核糖核酸钾离子通道 kcnd3 亚基信使核糖核酸L 型钙通道 α1C 亚基信使核糖核酸T 型钙通道 α1H 亚基信使核糖核酸1CdCl2Cadmium chloride氯化镉NiCl2Nickel chloride氯化镍TTXCsCl BaCl2Tetrodotoxin Cesium chlorideBarium chloride河豚毒素氯化铯氯化钡HEPESN’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulf anic acidRT-PCRReal time fluorescent quantitative reverse transcriptase polymerase chain reactionEGTAEthyleneglycol-bis(2-aminoethylether)-N,N, N, N,- tetraacetic acid羟乙基呱嗪实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应乙二醇二乙醚二胺四乙酸2Islet-1 促 C3H10T1/2 细胞向心肌细胞分化过程中电生理特性的研究摘要目的用 Islet-1 慢病毒表达载体转染 C3H10T1/2 细胞，使其高表达 Islet-1，特异性诱导 C3H10T1/2 细胞分化为心肌样细胞，通过检测诱导后各组细胞钠钾钙离子通道编码基因以及细胞膜离子通道电流的表达情况，分析明确 Islet-1 可诱导 C3H10T1/2 分化为具有电生理功能的心肌样细胞。方法复苏并传代培养 C3H10T1/2 细胞，将生长状态良好的细胞按 1×104/ 孔接种于 24 孔板内，待细胞融合至 70%时加入慢病毒表达载体转染 C3H10T1/2 细胞，荧光显微镜观察转染慢病毒后细胞绿色荧光蛋白表达以及细胞形态变化，流式细胞术检测慢病毒转染效率，并用 western blot 检测转染慢病毒后 Islet-1 表达情况；差速贴壁法分离培养新生小鼠心肌细胞，细胞免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞钠钾钙离子通道编码基因表达水平，并采用全细胞膜片钳技术检测细胞膜钠钾钙离子通道电流的表达，与空白对照组（未处理的 C3H10T1/2