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指纹图谱技术在植物研究领域中应用 　　摘要：文章对指纹图谱的产生及其概念进行了介绍，综述了国内外有关指纹图谱研究的进展。论述了指纹图谱的作用、构建程序以及指纹图谱研究过程中存在的问题。重点探讨了现代分析技术在指纹图谱研究中的应用，最后，对指纹图谱技术的研究前景进行了展望。 　　关键词：指纹图谱；药用植物；研究；应用 　　 　　随着中国加入WTO，药用植物产品如何被世界所认同和接受，已经成为中医药产业面临的重要课题。实践证明系统分析药用植物的化学成分，阐明有效部位和活性成分的种类是可行的，建立全面反映所含活性成分的指纹图谱，将更加有效地体现药用植物活性成分的整体性和综合作用，从而更好地评价药用植物的质量。 　　 　　一、指纹图谱的产生与研究进展 　　 　　（一）指纹图谱的概念 　　指纹图谱是经色谱或光谱测定得到的组分群体的图谱或图像。中药指纹图谱是指某种（或某产地）中药材或中成药进行适当处理后，采用一定的分析手段得到的、能够标示该中药材或中成药特性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱，它具有特征性和稳定性。指纹图谱能全面、综合地反应和控制中药或天然药物质量。 　　（二）国内外研究进展 　　植物药指纹图谱的研究始于20世纪70年代，但主要限于学术界。德国和法国联合开发银杏叶提取物Egb761，找到了最佳银杏提取物的指纹图谱，导致植物药在欧美重新流行。日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代末就已普遍采用色谱方法来监控其产品质量。韩国、日本、德国等，都比较重视对植物药的开发和利用。中药指纹图谱技术是随现代分析技术的发展而诞生的。中国中药指纹图谱研究最早可以追溯到20世纪60年代，但由于当时的主客观条件限制和时机不够成熟，这些探索没能继续下去。后来不断有人研究，但主要限于学术研究的层面，在传统的中药质量控制模式中，没有指纹图谱的要求，所以对中国中药产业没有任何触动。 　　近年来，随着中药现代化、国际化的深入发展，政府、企业和研究人员越来越清醒地认识到控制中药的质量是亟待解决的关键技术之一。中国中医研究院中药所的指纹图谱标准规范化研究，对一批中药材进行检查、鉴别、含量测定等指纹图谱方面的基础性研究，从而建立起一套完整的对中药材质量全面综合的评估系统。中国国家药品监督管理部门也于2000年发布了《中药注射剂的指纹图谱研究的技术要求（暂行）》，明确要求对新申报的中药注射剂和已上市的中药注射剂实行指纹图谱标准。2003年，国家采用中药指纹图谱检测标准后第一个批准上市的中药注射剂已正式投产。中国在中药指纹图谱取得的成绩得到了国际同行的肯定，WHO也因此委托国家药品监督管理局起草《国际草药标准》。 　　 　　二、指纹图谱的作用及其构建 　　 　　（一）指纹图谱的作用 　　指纹图谱在评价中药质量中的作用主要可以概括为观察指纹图谱的整体特征以鉴别生产前药材的真伪；指纹图谱可以区分植物药材的不同部位；可以考察商品药材及成药的质量；从标准指纹图谱可追踪制剂中某些化学成分的变化；可以检测原料与成品之间，成品的批间质量的稳定性。中药指纹图谱是从宏观上整体把握中药质量，而不是分析单一的、少量的成分。使评价中药质量更加科学化、标准化。通过指纹图谱可以鉴别样品的真伪优劣。指要建立稳定的中药指纹图谱必须规范原材料的来源，因此中药指纹图谱对中药种植GAP实施起到指导监督作用。 　　（二）指纹图谱的构建 　　构建指纹图谱的主要步骤：样品采集、方法建立、数据分析、样品评价和方法检验。应收集10批以上相互独立、具有代表性的原料药材和多批次半成品、成品样品进行分析，并且应注意将与产品功能主治相关的有效部位尽可能完全地提取出来。测定指纹图谱后，标定各生产步骤指纹峰及相似度，即可起到对药品从原料到成品进行全过程质量控制的作用。系统全面取样后的提取成分应尽可能全面。研究人员在找出各样品共同成分的同时，更注重发现不同来源（不同品种、产地或栽培条件）样品问的差异。 　　 　　三、现代分析技术在指纹图谱研究中的应用 　　 　　（一）薄层色谱（TLC） 　　薄层色谱法用固定波长对薄层展开的各斑点作薄层扫描的扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确，还可计算各峰的峰面积与标准峰的比作量化指标，因而具有更好的指纹鉴别意义，是目前应用最广泛的建立指纹图谱的方法。在新药研制中，几乎所有的新药都必须提供薄层色谱，并需附有标准品或对照药材、阴性样品对照的彩色图片。在实际的薄层层析鉴别中，因药用植物成分的性质相近而难以分开时，还可采用高效薄层色谱法。微乳薄层色谱法（ME-TLC）是最新发明的一种技术。与传统的TLC法中的有机溶剂相比，它具有无毒，不可燃，可操作性强，价格便宜等优点。由于其具有诸多优点，目前被广泛应用于分析欧亚甘草属（Glycyrrhiza）植物