壳聚糖及其衍生物对深ⅱ度烫伤大鼠的镇痛和促进愈合作用分析-analgesic and healing - promoting effects of chitosan and its derivatives on rats with deep second degree scald.docxVIP

壳聚糖及其衍生物对深Ⅱ度烫伤大鼠的镇痛和促进愈合作用研究摘要目的壳聚糖及其衍生物具有良好的生物学特性，应用于各个领域。在医药领域中，壳聚糖及其衍生物可以作为医用敷料、人工皮肤等原材料，具有止血止痛、促进愈合的功能。有报道称壳聚糖及其衍生物的止痛的功效，可能是由于其弱碱性不会对伤口造成刺激，而其促愈合的原因有可能是促进相关生长因子和相关创伤修复细胞的迁移和增殖。对于促愈合效果的研究较常见，但是对其镇痛作用的研究鲜有报道。本课题基于此，对壳聚糖及羧甲基的壳聚糖镇痛作用展开深入研究，同时基于本实验室前期工作基础上，对壳聚糖和羧甲基壳聚糖的促进创伤愈合方面进行对比研究，并结合文献资料对促愈合机理进行探讨。方法在动物个体水平研究了壳聚糖和羧甲基壳聚糖的镇痛和促愈合作用及机理，通过小鼠甩尾和热板实验，研究羧甲基壳聚糖高、低剂量对小鼠的镇痛作用。对小鼠进行热刺激，测定小鼠因热刺激尾部甩出水面以及舔足反应潜伏时间。制作大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型，用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定血清中致痛因子舒缓激肽（BK）和5-羟色胺（5-HT）的含量，研究壳聚糖及羧甲基壳聚糖的镇痛作用；通过测定伤口处羟脯氨酸（Hyp）的含量，记录各组愈合时间、制作伤口皮肤病理切片，评价壳聚糖和羧甲基壳聚糖促进烫伤创面的愈合作用。结果甩尾和热板实验表明羧甲基壳聚糖高、低剂量均可以延长小鼠对热刺激的甩尾时间以及舔足反应潜伏时间，差异极显著（P0.01）。烫伤实验表明，烫伤后3小时BK的含量达到高峰，而后逐渐降低，12小时后趋于正常水平，壳聚糖对大鼠血清BK的含量没有影响，与对照组相比没有显著差异，羧甲基壳聚糖明显降低烫伤大鼠血清BK含量，显著低于对照组（P﹤0.05），更加接近正常值；壳聚糖同样对血清中5-HT的含量没有影响，羧甲基壳聚糖则明显降低5-HT的含量（P﹤0.05），与BK的结果一致。BK和5-HT是强致痛因子，羧甲基壳聚糖可以降低BK和5-HT的含量，从而发挥镇痛作用。壳聚糖和羧甲基壳聚糖均可以显著促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合过程，显著缩短愈合时间（P﹤0.05，P﹤0.01）。烫伤3-14天过程中，壳聚糖组和羧甲基壳聚糖组与对照组相比，羟脯氨酸含量增加，差异极显著（P﹤0.01），在第7天含量达到高峰，表明壳聚糖及羧甲基壳聚糖通过促进胶原蛋白的合成而发挥促愈合作用。结论羧甲基壳聚糖可以延长热刺激小鼠的甩尾时间和舔足时间，同时降低致痛因子BK和5-HT的含量，表明羧甲基壳聚糖对损伤引起的疼痛具有镇痛功效。壳聚糖因其只溶于弱酸的性质而未显示出良好的镇痛作用。壳聚糖和羧甲基壳聚糖均可以加速胶原蛋白的合成，促进创伤愈合。关键词：壳聚糖；羧甲基壳聚糖；镇痛；创伤愈合AnalgesicandwoundhealingeffectsofChitosananditsderivativeonscaldedratsAbstractObjectiveTheexposureoftheskinandotherorganstodamaging,orpotentially-damaging,‘noxious’stimulielicitstheintenselyunpleasantsensationofpain.Injurytotheskintriggersacascadeofcellularandbiochemicaleventsincludingcoagulationandhaemostasisphase,inflammatoryphase,proliferativephaseandremodelingphase,whichfinallyleadtoatleastpartialreconstructionofthewoundarea.Chitosananditsderivativeshavegoodbiologicalcharacteristicsandbeenwidelystudiedandappliedinmanyfield.Inthefieldofmedicine,becauseofitsstoppingbleeding,analgesiaandpromotinghealingfunctions,chitosananditsderivativescanbeusedastherawmaterialsofmedicaldressings,artificialskinandsoon.Reportsindicatedthatchitosananditsderivativeshaveanalgesiceffect;reasonmayduetotheirweakalkalineandwillnotcauseirritationtothewound,howevertherearefewstu