雷帕霉素对大鼠血管平滑肌细胞迁移及sdf1α表达的影响-effects of rapamycin on migration of vascular smooth muscle cells and expression of sd f1 α in rats.docx

- - PAGE 10 - 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 主要缩略语英文索引 2 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 3 HYPERLINK \l _bookmark2 ABSTRACT 5 HYPERLINK \l _bookmark3 正文 7 HYPERLINK \l _bookmark4 引言 7 HYPERLINK \l _bookmark5 实验材料 8 实验方法 10 HYPERLINK \l _bookmark6 实验结果 16 讨论 27 HYPERLINK \l _bookmark7 结论 30 参考文献 31 HYPERLINK \l _bookmark8 文献综述 35 硕士期间发表、待发表论文 49 主要缩略语英文索引 (ABBREVIATIONS) 缩略语 英文全称 中文译名 As atherosclerosis 动脉粥样硬化 BCA bp bicinchoninic acid base pair BCA 蛋白定量法 碱基对 cDNA CXCR4 DAB DMSO ELISA HE MOD complementary DNA CXC chemokine receptor 4 3,3-diaminobenzidine dimethyl sulphoxide enzyme linked immunosorbent assay hematoxylin and eosin mean optical density 互补脱氧核糖核酸 CXC 趋化因子受体 4 二氨基联苯胺 二甲基亚砜 酶联免疫吸附测定 苏木精和伊红 平均光密度 MTT methyl thiazolyl tetrazolium 甲基噻唑基四唑 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 PTCA percutaneous transcoronary 经皮腔内冠状动脉成 Angioplasty 形术 PVDF RNA Polyvinylidene fluoride ribonucleic acid 聚偏二氟乙烯 核糖核酸 Rs restenosis 再狭窄 RT-PCR RPM SDF-1α SD SDS VSMC reverse transcription PCR rapamycin stromal cell–derived factor alpha Sprague-Dawley sodium dodecyl sulfate vascular smooth muscle cell 逆转录聚合酶链反应 雷帕霉素 基质细胞衍生因子 1α SD（大鼠） 十二烷基硫酸钠 血管平滑肌细胞 雷帕霉素对大鼠血管平滑肌细胞迁移及 SDF-1α 表达的影响 硕士研究生：雷建军 导 师：王 佐 教授 中文摘要 目的：探讨雷帕霉素抗血管内再狭窄作用及其与基质细胞衍生因子 1α （SDF-1α）表达的相关性。 方法：①动物实验：20 只 12 周龄 SD 大鼠行颈总动脉球囊拉伤，建立血管 内膜增生的动物模型，随机分为对照组（服用等体积的生理盐水）和雷帕霉素处 理组（口服雷帕霉素），4 周后处死动物。HE 染色观测血管病变，免疫组化检测 增生内膜中 SDF-1α 的表达，小室迁移系统观察 SDF-1α 对平滑肌细胞迁移的影 响，酶联免疫吸附试验检测血清 SDF-1α 水平。②细胞实验：原代培养 SD 大鼠 胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMC），MTT 法检测不同浓度的雷帕霉素（0、1、 10、100ng/ml）对 VSMC 增殖的影响，transwell 小室法检测不同浓度的雷帕霉素 （0、1、10、100ng/ml）对 VSMC 迁移的影响，RT-PCR 和 Western blot 分别检 测不同浓度的雷帕霉素（0、1、10、100ng/ml）对 VSMC SDF-1α mRNA 和蛋白 表达的影响。 结果：球囊拉伤明显诱导血管内膜增生，增生内膜中有明显的 SDF-1α 的表 达，雷帕霉素能显著下调增生内膜和血清中 SDF-1α 的表达，且 SDF-1α 能浓度 依赖性地诱导平滑肌细胞的迁移；MTT 法测定结果表明 1、10、100ng/ml 的雷 帕霉素都能显著抑制 VSMC 增殖（p＜0.05 或 p＜0.01）；transwell 小室法检测结果 表明 1、10、100ng/ml 的雷帕霉素都能显著抑制 VSMC 迁移（p＜0.05 或 p＜0.01）， 且呈浓度依赖性；RT-PCR 和 Western blot 检测结果表明，1、10、100ng/ml 的雷 帕霉素都能显著抑制 VS