2.2动物细胞融合与单克隆抗体的制备.docVIP

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教案 郓城一中 杨雪瑞 教学目标：举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 教学重点：单克隆抗体的制备和应用。 教学难点：单克隆抗体的制备过程。 教法：读书指导法、比较归纳法、反馈校正法 学法：自学读书法、讨论法、题组练习法 教学过程： 一、复习旧知识 导入新课 今天我们学习动物细胞融合与单克隆抗体，我们现对相关的旧知识进 行复习，同学们做一下学案上的复习题（1、抗体是由 细胞接受抗原刺激增殖分化产生的 细胞分泌的，具有 性，即一种抗体只能识别中和一种抗原。 2、常用诱导植物细胞融合的方法有物理方法和化学方法，物理方法包括 、振荡、 等，化学方法一般是用 (简称 )作为诱导剂来诱细胞融合。3、写出植物体细胞杂交技术的流程图）。（两名学生板演复习题答案）我们看一下黑板上两位同学的答案是否正确。同学们可以与课件上的正确答案对比一下（改正）。 在各个过程中，从去壁到形成杂种细胞形成应用的是植物体细胞融合技术，复习了植物体细胞的融合后，我们再来看一下动物细胞的融合过程。 二、讲授新知识 （一）、动物细胞融合： （课件显示动物体细胞融合的过程）大家认真观察这幅示意图，与植物体细胞的杂交过程做一下比较。看一下两者的原理、过程和诱导方法是否相同。（约一分钟后）（单独提问）植物细胞融合的原理是什么？（膜具有流动性）与动物细胞融合的原理相同吗？（相同）那动物细胞融合与植物细胞融合的过程和诱导方法也相同吗？有没有不同点，（动物细胞融合和植物体细胞杂交的技术方法基本相同，但植物细胞杂交时需要先去细胞壁，不能用灭活的病毒作诱导剂，而动物细胞融合过程不需要去细胞壁，还可以用灭活的病毒作诱导剂。）能不能用未灭活的病毒作诱导剂？（不能）为什么？魏春英（因为不灭活的细胞会感染动物细胞，对其带来损伤）通过旧知识的比较，我们很容易的理解了动物细胞融合，这样我们就完成了本节课的第一个学习目标：理解动物细胞融合的原理和过程。（课件显示教学目标） 动物细胞融合技术已经广泛应用于细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等领域，但它最重要的应用就是制备单克隆抗体。下面我们要完成第二个学习目标（课件显示）：举例说出单克隆抗体的制备和应用。 （二）、请单克隆抗体： 同学们在阅读课本52页的最后一自然段弄清两个问题：1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？2、B淋巴细胞有什么特点？（课件显示问题）这两个问题的答案在教材上找到了吗？（单独提问）（1、传统的抗体生产方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差）同学们背下来了吗？（没有）如果考试时卷面上出现了这个问题，你写出的答案能像教材上描述的一样准确吗？（不能）那我们现在就把教材上的叙述记下来吧！（1~2分钟后）现在我们来检测一下同学们是否记住了，同学们看课件上的填空，我们一起来答（课件显示本问题的填空）第二个思考题（单独提问）（2、B淋巴细胞能产生抗体，但每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异的抗体。） 很好，正是由于B淋巴细胞的这个特点，所以要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆形成细胞群，这些细胞是由同一个细胞无性繁殖得到的，有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，这就是单克隆抗体 在体外培养的条件下，B淋巴细胞能无限增值吗？（不能）那怎样才能得到由单个B淋巴细胞无限增殖的得到的细胞群呢？（学生可能答不出来，可能答出一小部分）这就应用到动物细胞融合的知识，我们来看一下科学家米尔斯坦和柯勒是怎样做的。大家结合课件所演示的问题（课件显示1.两位科学家极富创造性的设想是什么？2.单克隆抗体制备的基本过程如何？） Xxx来回答第一个思考题（1.如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得的融合细胞既能大量增殖，又能产生足够量的特定抗体。） 正是科学家先有了这个极富创造性的设想，然后经过努力把它变成了现实。那么科学家是怎样获得的B淋巴细胞（对小鼠注射抗原，使其发生免疫反应，再从其体内获得B淋巴细胞.） 如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起，又有几种融合方式？只考虑两个细胞间的融合。（有B淋巴细胞间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合以及。）这三种融合方式形成的杂交细胞中哪一种是我们所需要的？（B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交细胞）我们把这种细胞叫做杂交瘤细胞。 那么,杂交瘤细胞筛选出来？(先用选择性培养基，只有杂交瘤细胞能在选择培养基上生存)筛选出的杂交瘤细胞一定能产生抗体吗？（不一定）这就需要我们检测一下那个细胞能产生特异性抗体，并通过再