lc审审msms法在薁磺酸钠和双醋瑞因ⅰ期临床研究中的应用-application of lc examination msms method in phase i clinical study of azulene sodium sulfonate and diacerein.docxVIP

华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I 摘要 新药临床试验是新药上市之前进行药物评价的重要手段和工具，是以人为研 究对象来评价药物的安全性和有效性。药物在人体内的代谢比较复杂，而大多数 药物是通过进入血液循环再进入其他组织，药物必须在作用靶位达到一定浓度才 能发挥疗效。因此准确地测定药物在血液、体液或其他组织中的浓度是有效评价 药物的关键。液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）以其灵敏度高、选择性强、 准确性好等特点在药物的检测及结构鉴定中得到了广泛的应用和发展。 第一节建立了 LC-MS/MS 法测定人血浆及尿液中薁磺酸钠浓度并应用于 12 名健康受试者的药代动力学研究，血浆样本直接采用乙腈沉淀法去除蛋白，以甲 醇-1 mM 乙酸铵水溶液（0.15/0.05, v/v）作为流动相，尿液样本以甲醇为沉淀剂 处理，流动相为甲醇-1 mM 乙酸铵水溶液（0.12/0.08, v/v），均以苯妥英钠为内标。 血药浓度结果用 DAS2.1.1 计算药代动力学参数，对主要药代动力学参数用 SPSS13.0 进行统计分析。结果显示：受试者在服用薁磺酸钠片 2 mg、4 mg 两个 剂量后的药代动力学行为呈线性关系，多次给药后的平均蓄积因子为 1.91，表明 该药在体内有蓄积，尿中检测出了薁磺酸钠原型，计算结果显示 0-24 h 内有 15.66%的薁磺酸钠经尿排出。 第二节建立了测定人血浆中双醋瑞因代谢物大黄酸的 LC-MS/MS 法，并评 价了两种双醋瑞因制剂的生物等效性。该法以乙腈为沉淀剂处理血浆标本，以乙 腈-2 mM 乙酸铵 0.2%甲酸水溶液（0.18/0.12, v/v）作为流动相，大黄素为内标。 血药浓度用 DAS2.1.1 计算药代动力学参数，其中 Cmax、AUC0-t、AUC0-∞应用经 对数转换后进行方差分析，并进一步采用双向单侧 t 检验及[1-2α]%可信区间法 进行生物等效性评价。其中 Tmax 采用 Wilcoxon 符号秩检验法。Cmax、AUC0-t 和 AUC0-∞方差分析显示制剂间均无差异，双醋瑞因受试制剂的 AUC0-t 90%可信限 为 93.7%～112.5%，AUC0-∞ 90%可信限为 93.5%～110.5%；Cmax 90%可信限为 92.4%～104.1%，Tmax 经秩和检验无显著性差异（P0.05）；结果表明受试制剂和 参比制剂具有生物等效性。 关键词 LC-MS/MS；Ⅰ期临床研究；薁磺酸钠；双醋瑞因；药代动力学；生物等 效性评价 II II Abstract The clinical trial is the important means and tools of drug evaluation before appearing on the market. It was used to evaluate the safety and effectiveness of drug on people. Drug plays the effects when the concentration reaches to the effective concentration. Most drugs reach organizations through blood circulation. It is crucial that the accurate determination of drug concentration in plasma, in serum and other organizations. The LC-MS/MS has a wide application and development in the determination of biological samples because of its high sensitivity, high selectivity and high accuracy. The first section described the determination of sodium guaiazulene sulfonatein in human plasma and urine by LC-MS/MS and the application to study the pharmacokinetics of sodium guaiazulene sulfonate in healthy Chinese subjects. The plasma samples were directly purified by acetonitril, and the mobile phase was consi