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愈创营养油促进大鼠皮肤缺损创面愈合实验研究 　　摘 要：目的:观察愈创营养油对大鼠皮肤缺损创面的修复。方法: 45只造成背部开放性皮缺损创面的大鼠,随机分为空白对照组（A组）、VEGF外敷组（B组）和涂抹愈创营养油组（C组）。观察各组大鼠创面愈合时间、通过检测CD31、CDK4的表达来探讨愈创营养油促进大鼠皮肤缺损创面愈合的机理。结果：①C组愈合时间最短,上皮生长最快,优于其他各组,与A、B组相比有非常显著性差异(Ｐ 　　关键词：愈创营养油；大鼠；实验研究 　　中图分类号：R285文献标识码：A 　　文章编号：1673-7717(2008)05-1087-03 　　? 　　Experimental Studies on Yuchuang Yingyang Oil in Full-thickness Skin Wounds of Rats 　　?ZHANG Chun?yu，ZHANG Zong?xue? 　　（Jinzhou Central Hospital,Jinzhou 121000，Liaoning,China） 　　Abstract：Objective:The study was aimed at investigating the mechanism of Yuchuang Yingyang Oil in accelerating wound healing into skin restoration. Methods：45 rats were randomized into three groups and 15 rats in each group.After anesthesia injected with ketamine (100mg/kg), under the aseptic condition,a 2.5cm×2.5cm full thickness wound was made. Group A (saline control group),group B（VEGF treatment group）,group C（Yuchuang Yingyang Oil treatment group）.On day 3，7，14 after wounding，the area and the size of wounds were measured，and histological examination was performed to evaluate the speed and quality of wound healing in different groups。Results：MDV（microvessel density）in the group C (per cm2)? was higher than group B and group A all time points(P[1]，深达筋膜。止血，待清醒后单笼饲养。? 　　1.3实验分组与给药方法 　　随机分为3组,空白对照组(A组)15只，VEGF外敷组(B组)15只,愈创营养油组(C组)15只。混合饲料单笼饲养,自然光照射，室温控制在25℃左右。创伤模型制成后,即刻在A组大鼠的创面上，生理盐水纱条并用无菌敷料包扎创面；B组大鼠的创面上敷含有40ng VEGF的明胶海绵，再用无菌敷料包扎创面；C组大鼠在创面上用愈创营养油涂抹1mm厚,然后再予无菌敷料包扎创面。每组均为隔日换药1次，剂量同前，直至愈合。? 　　1.4观察项目与检测方法? 　　1.4.1创面愈合时间记录各组造模后至创面愈合所需时间。? 　　1.4.2组织学观察分别于3、7、14天，每组5只动物处死。取创面边缘至创面中心的宽约0.5cm的修复组织，置10%中性福尔马林溶液中固定后，常规脱水透明后，石蜡定向包埋,连续切片，片厚5μm，行HE染色后用普通光镜观察。? 　　1.4.3免疫组织化学方法观察采用过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)方法，按试剂盒说明书要求进行免疫组织化学显色。每蜡块做连续切片,等距离取石蜡切片,常规脱蜡至水, 3%的过氧化氢封闭10min后，行抗原修复, 5%正常山羊血清封闭，加入稀释的兔抗鼠CD31、CDK4多克隆抗体(1:100)，4℃过夜,加入生物素标记的羊抗兔IgG工作液，37℃孵育30min，滴加辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)，37℃孵育30min。以上步骤后均用PBS漂洗。二氨基联苯胺(DAB)显色，再行苏木素复染，脱水、透明、封片,光学显微镜观察结果。阴性对照:用PBS代替一抗。?阳性判定标准： 　　①微血管计数（MVD）：CD31进行微血管密度计数，凡是染成棕黄色的单个内皮细胞或内皮细胞族，均作为一个血管计