小肽基因合成及其串联体表达载体构建.docVIP

小肽基因合成及其串联体表达载体构建 　　摘 要：以人表皮生长因子为研究对象，分3段合成了hegf基因片段，运用套叠PCR技术进行连接，形成全长hegf(159 bp)并克隆到酵母表达载体pGAPZα-A中，利用同裂酶技术构建串联体表达载体，获得了分别含2、3、4拷贝的串联体表达载体pGAPZα-2hegf、pGAPZα-3hegf和pGAPZα-4hegf,为下一步进行基因表达及其生物学活性分析奠定了基础。 　　关键词：hegf基因合成；串联体；载体构建 　　中图分类号：Q782 　　文献标识码：A 　　文章编号：1007-7847(2007)01-0033-05 　　 　　表皮生长因子最初由Cohen及其同事从小鼠颌下腺分离得到，后在人尿中分离得到，人表皮生长因子(hEGF)是由53个氨基酸组成的小分子多肽，含有3个链内二硫键，结构稳定，研究表明，hEGF具有多种生物学功能，它通过与细胞膜上hEGF受体结合，促使细胞内部发生一系列复杂的生化级联反应而发挥生理作用，如它可促进细胞分裂，修复皮肤创伤、胃肠溃疡、角膜损伤等；防止皮肤衰老，起到美白嫩肤的作用；靶向性结合含高密度hEGF受体的肿瘤组织，大剂量的EGF还能抑制某些癌细胞的生长，商品化的hEGF具有很高的市场价值，且市场需求量大，提高其表达量及生物学活性可广泛用于临床，满足市场的需要。 　　利用基因重组技术是